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地榆水提液对四种癌细胞生长抑制作用探究
地榆水提液对四种癌细胞生长抑制作用探究
【摘要】 目的 研究地榆水提液对癌细胞生长的抑制作用。方法细胞形态观察和活细胞计数法研究地榆水提液对人白血病细胞K562,肝癌细胞HepG2,胃癌细胞BGC823,宫颈癌细胞Hela生长的抑制作用。结果地榆水提液可使4种癌细胞形态上发生皱缩、变圆、脱壁、碎裂等变化,生长受到明显抑制,抑制率最高可达85.20%。结论 地榆有确切的抑癌作用,并与中医的气血理论和药物归经理论相一致,再次说明了中医基本理论的博大精深,即便在体外细胞水平上也有良好体现,对实验室手段研究中医药同样有着重要指导意义。
【关键词】 地榆;癌细胞;生长;抑制作用
Abstract:ObjectiveTo investigate the inhibitory effects of the extract of Sanguisorba officinalis L. on human carcinoma cells.MethodsMorphological change observation and live cell accounting were used to investigate the inhibitory effects of Sanguisorba officinalis L. on human chronic myloid leukemia K562 cell,hepatoma HepG2 cell,cervical carcinoma Hela cell and gastic carcinoma BGC823 cell.ResultsGrowth of the four kinds of cells was significantly inhibited by the extract of sanguisorba officinalis L., highest 85.20% and cell morphological changes included shrinkage,roundness,floating and crumbling.ConclusionSanguisorba officinalis L. has reliable carcinoma-inhibiting effects and the effects conform to the “qi” and blood theory and the Meridian-reaching theory of traditional Chinese medicine.
Key words:Sanguisorba officinalis L.;Carcinoma cell; Growth ; Inhibitory effects
笔者在临床上见一癌症病人,经中医中药治疗,取得十分满意的效果,在征得主治医生同意后,将其方中出现频率较高的11种中药制成提取液,进行体外抑癌筛选,发现其中的地榆水提液具有良好作用,现将地榆水提液的研究情况报道如下:
1 器材
1.1 药材地榆生药购于内蒙古中蒙医院药房。取生药适量,六蒸水洗3遍,烘干,称量;六蒸水浸泡过夜,武火煮沸,文火煎煮40 min,纱布过滤,滤渣加适量六蒸水置115℃高压蒸气锅内30 min,纱布过滤;合并两次滤液,2℃冰箱静置72 h,高、中、低速滤纸,0.45 μm,0.22 μm微孔滤膜逐级过滤;滤液蒸发浓缩,灭菌,4℃保存,使用时以培养液稀释至所需质量分数(以生药计算)。
1.2 器材与试剂
倒置相差显微镜(Nikon eclipse TE2000-U),超净台(苏州净化设备有限公司),CO2培养箱(GALAXY amp;BINDER),24孔培养板(BIOFIL),RPMI1640,高糖DMEM(GIBCO),胎牛血清(TBD)。
1.3 癌细胞系人白血病细胞系K562,肝癌细胞系HepG2,胃癌细胞系BGC823,宫颈癌细胞系Hela(均由本实验室传代保种),均常规传代培养。
2 方法
2.1 实验分组每种细胞均设对照组(不加药)与观察组(加药),观察组分设高(4 mg/ml)、中(1 mg/ml)、低(0.25 mg/ml)3个浓度组。
2.2 加药处理取对数生长期的4种癌细胞,均以2×104/孔接种于24孔培养板,接种24 h后加药。加药后:①每天于倒置相差显微镜下观察细胞形态变化;②每隔24 h各组均取5孔细胞台朌蓝拒染法计活细胞数,每孔计3次,5孔取平均值,计算出当天的生长抑制率,抑制率(%)={(对照组平均活细胞数-观察组平均活细胞数)/对照组平均活细胞数}×100%,[1],连续6 d。
2.3 抑制效果的判断与分析
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