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大鼠海马CA1神经元对外周传入信号编码作用 　 作者：陈静芳 胡祁生　胡胜娣 王海梅 【关键词】 大鼠 　　摘要：通过外周电刺激坐骨神经，采用单个神经元细胞外记录的方法，观察大鼠海马CA1神经元对外周电刺激信号的编码作用。结果发现，多串电刺激后，大鼠海马CA1神经元爆发式放电数量明显增加，且动作电位个数大于3的爆发式放电数目也明显增多。实验结果说明大鼠海马CA1神经元对外周传入信号具有编码作用，参与对信号的调制。 　　关键词：大鼠；海马；爆发式放电 　　了解神经元对信息的编码是神经科学最基本的问题之一。神经元电活动是神经系统传输和编码内外环境信息的基本方式之一，生物电信号的传输主要是通过神经纤维上动作电位传导和突触间电、化学传递来实现的。神经元编码方式有频率编码、群体编码、时间编码和模式编码等［1］。有报道另一种新的神经元编码方式―短时爆发式放电，认为神经元间信号的交流是通过短时爆发式放电［2］。爆发式放电可作为神经元的信息携带单位已得到明确支持，许多实验也证明在不同的脑区如视皮质、海马，爆发式放电对信息的编码和传递起着重要作用［3］。海马属于边缘系统，与学习记忆、情绪行为和癫痫发作等密切相关，海马锥体神经元对信息的编码与传递具有十分重要的意义。本研究初步探讨外周电刺激对海马CA1神经元爆发式放电的影响，进一步探讨海马对信号的编码作用。 　　1 材料与方法 　　11 电生理实验 　　雄性SD大鼠200~250g，腹腔注射10%乌拉坦麻醉，常规气管插管，分离左侧坐骨神经，立体定向仪上固定，开颅，打开硬脑膜，37℃液体石蜡油保护脑组织。1～2h后，腹腔注射氯化筒箭毒（tubocurarini chloridi，1 mg#12539;kg-1 i.p）制动，人工维持呼吸。海马CA1神经元细胞外记录采用玻璃微电极记录，电极尖端直径约1~2μm，直流电阻10~20MΩ，用微电极推进器将电极插入海马CA1区（AP：4.0~4.5mm，LR：2mm，H：2.5~3.5mm）。神经元放电经微电极放大器放大后，显示在示波器上进行观察，同时输入BL410生物机能实验系统进行存储分析。记录到神经元放电后，每隔10min经双极不锈钢丝电极刺激坐骨神经一次。 　　12 资料分析 　　由于海马CA1神经元对刺激存在无反应、抑制和兴奋三种不同的反应，本实验对呈兴奋性反应且有爆发式放电的神经元进行统计分析。在分析电刺激对CA1神经元爆发式放电的影响时，由于电刺激产生的原发性单位和网络后放电均在刺激后20s内出现［4］，因此对刺激前后20s内神经元爆发式放电的数目进行统计分析，采用SPSS统计软件，Plt;0.05为具有显著性差异。 　　13 组织学鉴定 　　实验结束后，记录电极通以20μA阴极电流20min，滂胺天蓝标记电极尖端位置。生理盐水100mL及10%福尔马林100mL左心室灌流，断头取脑，石蜡包埋切片，HE染色确定电极尖端位置。 　　2 结果 　　21 海马CA1神经元爆发式放电 　　海马CA1神经元未受刺激时，可出现不规则的爆发式放电。在海马锥体神经元的爆发式放电又称为“复合放电”，它一般是由2~6个幅度逐渐减小的动作电位组成的快速高频放电，其动作电位间期一般小于25ms，频率约200Hz左右［2］。本实验中，记录到的不同形式的海马CA1神经元爆发式放电见图1。 　　22 电刺激对CA1神经元爆发式放电频率的影响 　　开始几串（一般1~3串）电刺激对神经元爆发式放电频率一般无显著性影响，大多数神经元在第5~6串电刺激后爆发式放电才发生明显变化，主要表现为刺激后20s内爆发式放电的数量增多，且可出现串内动作电位个数较多的爆发式放电，数量也逐渐增多。对第5串刺激前后20s内爆发式放电数目进行统计分析，刺激前爆发式放电数目为4.25±4.86个，刺激后为11.13±4.55个，频率增加明显（Plt;0.05，n=9）。 　　23 电刺激对爆发式放电神经元电活动的影响 　　实验中记录到一爆发式放电神经元，其放电特点是呈动作电位个数为3的爆发式放电，无单个放电。随着刺激串次的增加，爆发式放电数目逐渐增多，且出现动作电位个数大于3的爆发式放电，数目也逐渐增多（见表1）。图2中显示为第6串电刺激后神经元的放电图。表1 电刺激前后某神经元爆发式放电数量的变化（略） 注：表中N1表示爆发式放电出现的个数；N2表示动作电位数大于3的爆发式放电的个数。 　　　3 讨论 　　爆发式放电是一个用来描述神经元一种特殊类型的放电模式的术语，一般来说，爆发式放电是指某一段时间内放电频率较其它时间段高的放电串，至今，对爆发式放电仍没有明确的定义［2,5］。海马锥体神经元的爆发式放电又称为“复合放电”，它一般是由2~6个幅度逐渐减小的动作电位组成的快速高频放电，其动作电位间