应用逆转录多重PCR方法检测正常核型急性白血病患者易位相关融.doc

应用逆转录多重PCR方法检测正常核型急性白血病患者易位相关融 　 作者：马力，薛永权，潘金兰，何军，吴亚芳，岑建农，温丙昭 【摘要】 为了探讨逆转录多重PCR方法在检测具有正常核型的急性白血病（AL）患者的易位相关融合基因中的价值，应用包括19种染色体易位特异性引物对的逆转录多重PCR方法对37例经常规细胞遗传学方法揭示为正常核型的AL患者进行了检测。结果表明： 有8例（21.6%）AL患者分别检测出有PML/RARA、AML1/ETO、CBFβ/MYH11和BCR/ABL等4种融合基因的存在。 结论：逆转录多重PCR可在核型正常的AL患者中检出隐匿的染色体易位，故凡常规细胞遗传学显示为核型正常的AL患者，均应对其进行逆转录多重PCR检测。 【关键词】 急性白血病 　　Detection of Fusion Genes Associated with Specific Translocations in Acute Leukemia Patients with Normal Karyotypes by Using Multiplex RT-PCR 　　Abstract This study was aimed to explore the usefulness of multiplex reverse transcription-polymerase chain reaction（multiplex RT-PCR）in detection of fusion genes associated with specific translocations in acute leukemia (AL) patients with normal karyotypes.37 AL patients with normal karyotypes were analyzed by multiplex RT-PCR.The results showed that 4 types of fusion genes such as PML/RARA，AML1/ETO，CBFβ/MYH11，BCR/ABL were detected in 8 (21.6%) patients by multiplex RT-PCR.In conclusion，multiplex RT-PCR is useful in detection of fusion genes associated with specific translocations in acute leukemia (AL) with normal karyotypes and it would refine the karyotype analysis. When the normal karyotypes were detected in acute leukemia patients by conventional cytogenetic method，the multiplex RT-PCR should be performed for them. 　　Key words Multiplex RT-PCR; Acute leukemia; Normal karyotype 　　研究表明，细胞遗传学和分子遗传学在急性白血病（AL）的诊断分型，判断预后和指导治疗中占有重要地位，但是仍有一些AL患者经常规核型分析未能检出异常染色体改变，例如正常核型检出率在B-细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)、T-细胞ALL(T-ALL)和急性髓细胞白血病(AML)中分别达到10%-25%、30%-40% 和40%-47% ［1-3］。这是由于常规细胞遗传学对小于1条带的微小染色体改变不敏感的缘故。近年来，国内外已有若干报道应用逆转录多重PCR技术（multiplex reverse transcription-polymerase chain reaction） 可以筛选具有隐匿性染色体易位的AL患者。为了评估所谓正常核型的AL患者中隐匿性染色体易位的频率和逆转录多重PCR检测隐匿性染色体易位的价值，我们应用逆转录多重PCR对一组37例常规细胞遗传学证实为核型正常的AL患者进行了研究。 　　材料和方法 　　病例选择 　　2004年3月至2004年10月来苏州大学第一附属医院就诊的急性白血病患者共37例，其中男19例，女18例，年龄11-80岁，中位年龄43.6岁。所有病例均经骨髓细胞形态学、组织化学染色和免疫表型确诊，分别为M1 9例，M2 7例，M3 5例，M4 3例，M5 9例，M6 1例，T-ALL 2例，混合性急性白血病（B淋系，髓系）1例。所有病例在初诊时均做了染色体核型分析，同时抽取患者骨髓1-