利用Xa21基因的PCR标记进行抗白叶枯病水稻育种.pdfVIP

维普资讯 第∞卷第4期 华 中 农 业 大 学 学 报 Vd．20 No．4 2tD1年 8月 Joumal0fHum-~hongAgriculturalUniversity 】g 2tDI，310～313 利用 Xa21基因的PCR标记进行 抗 白叶枯病水稻育种 万丙 良 杨国才 ’ 陈志军 牟同敏 ’ 陈其志 (湖北省农科院杂交水稻工程技术研究中一，武汉4343064；湖北省取科院植转保护研究所，武汉4343064) 摘要 pT~248是与抗白叶枯病基因Xa21紧密连锁的 1个 PCR标记，采用多个Xa21基因供体和受体水稻 亲本以及抗(xa21)×感组台的E、 、 群体，对利用pTA248标记辅助选择进行水稻抗白叶枯病育种的有关问 题，包括抗感亲本间的遗传多态性、pTA248标记与Xa21位点的连锁关系，以及pTA248标记选择的准确性等作了 探讨。结果表明，pTA248标记在亲本间具有良好的多态性，与 Xa21基因位点紧密连锁，二者间重组率为0％一 1．3％，根据该标记的多态性表现可对抗(Xa21)×感组台后代材料中Xa21基因的基因型和表现型做出较为准确 的选择。 关键词 Xa21基因；分子标记；水稻 白叶枯病；育种 中图法分类号 s511．103．53 白叶枯病是水稻三大主要病害之一，在我国每 多个 Xa21基因供体和受体水稻亲本以及抗 (Xa21) 年均有不同程度的发生，给水稻生产造成严重损失， X感组合的F、 、F]群体作为试验材料对以上问 当其严重发生时，甚至造成颗粒无收。从70年代以 题进行了研究 ，希望能够对利用pTA248标记进行水 来我国育种工作者一直进行抗水稻白叶枯病育种工 稻抗白叶枯病辅助选择育种有所指导。 作．现已发现不少优 良的白叶枯病抗源，并育成一些 l 材料与方法 抗病品种。然而对于抗病育种来说，传统的育种方 法存在着一些缺陷，在传统的抗病育种过程中，需要 1．1 植物材料 对分离世代的材料进行抗性鉴定 ，由于发病环境很 选用3个抗 (Xa21)×感组合的R、 群体、 难人为控制，因而易带来鉴定结果的误差，甚至造成 株系，以及2个Xa21供体材料和5个非 Xa21材料 抗性基因的丢失，同时这种鉴定试验也较为烦琐。 作为试验材料。3个 抗 (Xa21)X感”组合为 以DNA为基础的现代分子标记技术的发展为农作 IRBB~21×C35S(不育系)、IRBB21×培矮 64S(不育 物的抗病育种提供 了一条新的有效途径，它通过 系)、IRBB21×905(恢复系)；2个 Xa21供体亲本为 DNA标记直接跟踪抗性基因。无须每一世代进行接 IRBB~21、IRBB57；5个非 Xa21材料为恢复系9311、 种鉴定，结果稳定；对于基于PCR的分子标记，检测 905、明恢 63，不育系c35s、培矮64S。 十分方便，一般实验条件即可操作。Xa21基因是一 1．2 试验方法 个广谱抗 白叶枯病基因，对我国分布的白叶枯病菌 1)Xa21基因抗性标记的PCR检测。分单株取幼 具有 良好的抗性，该基因被定位在水稻染色体组第 Ⅱf提取DNA ，根据 Chunwangse等 (1993)提供的 11染色体上，并已找到与该基因紧密连锁的PCR标 Xa21基 因抗性标记 pZ~248的序列 (引物 1：5 记…，从而使利用该标记进行抗 自叶枯病育种具有 — 3’；引物 2：5’一aga％cggla 可能。但是，要将该标记实际应用于抗病育种，还应 aWg~aagntgaaa-3’)合成引物，利用96OO型PER仪(美国 考虑该标记在抗感亲本间是否具有广泛的多态性，PE公司)进行扩增，0．8％琼脂糖凝胶分离，溴化乙 与Xa21基因在不同群体中的连锁关系，以及根据 锭 (EB]染色，紫外透射仪下观察照相。PCR反应体 标记进行 目的性状选择的准确性等问题。笔者采用 系总体积15 l，其中含1×PCR缓冲液 ，2．0mmol／L 收稿 日期：20~0-12