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微波提取百合总黄酮及抗氧化性探究 　【摘要】 目的在微波条件下寻找提取百合总黄酮的优化条件。方法对百合中黄酮类化合物的微波提取及其抗氧化性进行研究。提取采用正交实验法，抗氧化性研究采用培养箱储藏法。结果百合总黄酮类化合物的最佳提取工艺条件为乙醇体积分数80%，提取时间4 min，固液比1 g∶20 ml，微波功率620 W，提取率可达6.78%。结论微波法提取百合总黄酮含量较高;抗氧化性结果显示，提取物的加入量对猪油的自氧化有量效关系。提取的黄酮类化合物对猪油的氧化有明显的抑制作用，且随加入量的增多，抗氧化能力增强。 【关键词】 微波提取; 总黄酮; 百合; 正交实验; 抗氧化性 　百合L.brownij var. viridulum Baker为百合科百合属植物，是多年生的鳞茎草本花卉植物。百合以鳞茎供食用，味甘性平，无毒。百合鳞茎含蛋白质、脂肪及多种生物碱，并富含淀粉及少量钙、磷、铁等。其具有益气安神、润肺止咳之功效，适用于治疗体虚肺弱、失眠、心悸、精神不宁等症[1]。 　　黄酮类化合物是一类在植物界广泛分布的酚性组分，目前已知的黄酮类化合物单体己达八千多种，黄酮类化合物可分为黄酮、黄酮醇、异黄酮、二氢黄酮等。微波提取技术是利用微波能来提高提取率的一种新技术，与常规方法相比，微波提取具有选择性高、快速高效、溶剂消耗小、活性成分得率高、不产生噪音、适合热不稳定物质等特点[2，3]。近年来研究发现黄酮类化合物有抗突变、抗肿瘤、抗炎、抗菌、降血脂、镇痛、治疗心血管疾病等广泛生物学活性，其中最为重要的是它能减少自由基形成和清除自由基的抗氧化活性，对含脂食品的自动氧化防止有一定的作用，是一类值得深入研究的天然产物[4～6]。本实验通过对百合微波提取总黄酮及抗氧化性研究，为提供百合的药物及抗氧化作用研究提供理论基础。 　　1 材料与仪器 　　百合购自泉州医药百合连锁公司涂门店，产地甘肃兰州。于57℃下烘干，研碎后过60目筛备用。芦丁对照品(中国药品生物制品检定所，纯度98%)。美的微波炉(广州美的电器有限公司);UV-1100型紫外可见分光光度计(上海诺顶仪器设备有限公司);MP200B电子天平(上海精密仪器仪表有限公司);离心机(LC10-24A，北京医用离心机厂)。化学试剂均为分析纯，北京化工厂生产。 　　2 方法 　　2.1 百合总黄酮含量的测定方法 　　2.1.1 标准曲线的制作精确称取120℃干燥恒重的芦丁510 mg， 用60%微热乙醇定容至50 ml，摇匀， 得浓度为0.1 mg·ml- 1的标准液[7]。准确吸取标准液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml于6支具塞试管中，加30%乙醇，使各试管溶液为5 ml，各加5%NaNO2溶液0.3 ml，摇匀，放置6min，加10%Al(NO3)3溶液0.3 ml，摇匀，放置6 min，加1 mol·L-1NaOH溶液4 ml，蒸馏水0.4 ml，摇匀，放置10至15 min，用85%的乙醇作空白对照，于510 nm 波长下测定吸光度，以吸光度值对芦丁对照品含量绘制标准曲线，回归方程A=1.104 9C+1.6×10-3，其线性范围为0～0.5 mg，相关系数r= 0.999 8。 　　2.1.2 百合总黄酮的微波提取准确称取百合粉末2.00 g置烧杯中，根据试验设计分别选用不同超声波频率、固液比、处理时间、乙醇浓度进行总黄酮提取。在用微波处理前，每个样品瓶所配5瓶空白瓶，均需凉至室温，以减少试验误差[7～9]。准确吸取4 ml经微波提取的粗提液于装有200 mg聚酰胺粉的小烧杯中，搅匀，然后转移至装有400 mg聚酰胺粉的砂芯层析柱中(已用70%乙醇预处理)，吸附10 min，用乙醇的不同浓度梯度逐级洗脱， 以70%，80%，90%，100%的乙醇各10 ml依次洗涤，收集各级洗涤液，用85%的乙醇定容至50 ml，备测。 　　2.1.3 百合总黄酮含量测定精确吸取5 ml样液3份于3支具塞试管中，各加5%NaNO2 溶液0.3 ml，摇匀， 放置6 min，各加10%Al(NO3)3溶液0.3 ml，摇匀，放置6min，各加1 mol·L-1NaOH溶液4 ml，蒸馏水0.4 ml，摇匀，放置10至15 min，用85%的乙醇作空白对照， 于510 nm 波长下测定吸光度A。总黄酮得率按下式计算： 　　得率(%)=(C×V1×V3)/(W×V2×V4)×100%式中，C为根据回归方程计算得到的总黄酮量(mg);V1为抽提定容的体积(ml);V2聚酰胺处理时取样的体积(ml);V3聚酰胺处理后定容的体积(ml);V4显色反应测定取用样液体积(ml);W为称样量(g) 　　2.1.4 微波