当归补血汤对高尿酸血症大鼠血管内皮细胞功能影响.docVIP

当归补血汤对高尿酸血症大鼠血管内皮细胞功能影响 　 作者：李亚芹，刘文敏，孙学江 【摘要】 目的观察当归补血汤能否通过降低尿酸而改善大鼠血管内皮细胞功能。方法将40只大鼠随机分成对照组、模型组、治疗组(低、中、高)剂量，模型组给予高尿酸饮食，对照组给予普通饮食，治疗组给予高尿酸饮食的同时给予当归补血汤治疗(低、中、高)3个治疗剂量;14 d后分别测定各组大鼠血管内皮细胞所分泌的一氧化氮(NO)和一氧化氮和酶(NOS)含量，同时测定血清中尿酸含量、治疗组与模型组比较，观察各项指标有无统计学意义。结果①与对照组相比：高尿酸血症组大鼠内皮细胞产生的NO，NOS均减少，有统计学意义(Plt;0.05)。②治疗组与模型组相比较：给予当归补血汤治疗后血清尿酸水平降低，同时血管内皮细胞分泌的NO和NOS含量升高，其中中剂量组与模型组相比有显著的统计学意义(Plt;0.05)，低剂量和高剂量组与模型组相比无统计学意义。结论当归补血汤可以通过降低尿酸而改善血管内皮细胞功能。从而治疗冠心病。 【关键词】 当归补血汤; 高尿酸血症; 内皮细胞功能 当归补血汤源于金代李杲的《内外伤辨惑论 ·景伤胃气论》，全方由黄芪和当归按5∶1组成，是中国传统的补气养血的代表方剂，主治劳倦内伤，气弱血虚，阳浮外越。在临床上用于劳累性心绞痛和心肌梗塞后正虚邪恶，气血双亏，心失所养等症[1]。该方应用广泛，但关于它对尿酸水平的影响的研究很少，本实验通过给予高尿酸血症大鼠当归补血汤治疗，一方面观察其对尿酸水平的影响，另一方面观察其对血管内皮细胞功能的影响。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物Wistar 大鼠60只，雌雄各半，体重(250±10)g，由河北医科大学实验动物中心提供。合格证编号805108。 　　1.2 实验药品腺嘌呤(Adenine)，批号H65821购自南京建成生物制品有限公司 ，乙胺丁醇片(Ethambutol),批号T08B524，购自杭州民生药业集团有限公司。当归补血汤，当归∶黄芪为5∶1，由河北保定古城医药生产 。试剂盒均购自南京建成生物制品有限公司。 　　1.3 实验仪器 双功能水浴恒温振荡器(型号：SHA-BA 产地：金坛市杰瑞尔电器有限公司);漩涡混匀器(型号IKA-MSZ 产地： IKA Works Guangzhou);低速台式离心机(型号 TDL-5-A,产地：上海安亭科学仪器厂);501-A型超级恒温器(产地：上海,实验仪器厂有限公司);Stat-Fax-2100酶标仪(产地：Awareness technologying.);高速冷冻离心机(型号 GL-16G-Ⅱ型 产地：上海安亭科学仪器厂)。 　　1.4 动物模型的制备高尿酸血症动物模型的建立采用腺嘌呤+乙胺丁醇法， 腺嘌呤100 mg·kg-1·d-1+乙胺丁醇250 mg·kg-1·d-1，溶于2 ml生理盐水中灌胃1次/d，共7 d，此种方法制造的模型尿酸水平稳定升高，乙胺丁醇的应用增加了尿酸在体内的蓄积[2]。 　　2 方法 　　将实验动物随机分成5组，对照组与模型组，治疗组(低、中、高3个治疗组)，各组动物均为雌雄各半。首先自由饮食1周，然后对照组给予普通饮食，模型组给予高尿酸饮食，治疗组给予除高尿酸饮食外，同时给予当归补血汤，低、中、高3个剂量分别按3.0，6.0，12g/kg/d给予大鼠灌胃，1次/d，14 d后处死大鼠，腹主动脉取血，高速离心后取血清进行检测，同时留取主动脉血管内皮细胞，孵育后检测一氧化氮及一氧化氮合酶。 　　2.1 检测指标及方法分别检测对照组、模型组与治疗组中血清尿酸水平，看造模是否成功，同时看当归补血汤对尿酸的影响。检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的水平，看组织抗氧化情况及损伤的程度。取主动脉留取血管内皮细胞，检测一氧化氮(NO)的水平和一氧化氮合酶(NOS)的活性，各项指标的测定均采用酶联免疫吸附法，试剂盒均购自南京建成生物制品有限公司，具体操作步骤见试剂盒说明书。 　　2.2 统计学方法数据以(±s)表示，采用F检验，q检验，t检验，检验水准a=0.05。 　　　3 结果 　　表1 对照组、模型组与治疗组血清尿酸水平的比较对照组vs模型组，▲Plt;0.001;模型组vs低剂量组，▲Plt;0.001;中剂量vs模型组，▲Plt;0.001;高剂量vs模型组，▲Plt;0.001;低剂量vs中剂量，★Plt;0.05;中剂量vs高剂量，★Plt;0.05 　　图1 各组血清尿酸水平柱状图 　　以上结果表明，当归补血汤对降低血尿酸水平有明显的疗效，低、中、高剂量组均有疗效。表2 各组血管内皮细胞分泌的NO、TNOS、iNOS水平的比较 　　NO水平的统计学分析表明：模型组 vs对照组，★Plt;0.01;模型