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组织工程活性真皮构建探究 　 ; 作者：胡葵葵，戴育成，袁敬东 毕业论文 【关键词】; 成纤维细胞 毕业论文 　　摘要：目的; 探讨用脱细胞真皮(ADM)、胶原海绵膜(SCM)、胶原凝胶构建活性真皮的可行性。方法; 从幼儿包皮中纯化、扩增成纤维细胞(Fb)，将其分别种植于ADM、胶原凝胶、SCM上，观察细胞增殖及支架收缩等情况。结果; Fb在ADM上不能成活；在SCM上增殖良好，人工真皮收缩不明显；在胶原凝胶中增殖活跃，但人工真皮收缩明显。结论; 利用SCM构建的人工真皮，是一种较理想的活性真皮。 毕业论文 　　关键词： 胶原；成纤维细胞；支架材料；脱细胞基质 毕业论文 　　ABSTRACT: Objective; To build artificial dermis by using the acellular dermis, collagen membrane and collagen gel as scaffolds. Methods; The fibroblasts were isolated from infant skin. The 3rd generation cells were seeded into 3 different scaffolds. The artificial dermis was detected by HE staining, phase contrast microscope or scanning electron microscope. Results; The fibroblasts implanted on the ADM began to rupture and died after 2 to 3 days. Though the fibroblasts proliferated well in collagen gel, the artificial dermis contracted obviously. Another artificial dermis contracted slightly by inoculating fibroblasts on collagen membrane, and the fibroblasts on them were in appropriate proliferation. Conclusion; The artificial dermis built by collagen membrane as scaffolds has a preferable structure for an ideal substitute of skin. 毕业论文 　　KEY WORDS:collagen; fibroblast; trestle; acellular dermis matrix 毕业论文 　　皮肤组织工程的核心内容即创造出一种三维生长支架，将由肌体分离出的表皮细胞或成纤维细胞进行体外复合培养，形成人工再生的真皮等同物或皮肤等同物，移植于需要修复、重建的皮肤缺损处。在皮肤组织工程中，寻找能充分发挥组织再生潜能的细胞外基质材料是核心内容。真皮为皮肤提供牢固的机械保护并决定它的外观特征。 活性真皮的研制是皮肤组织工程研究中的重点及难点所在。本实验制备胶原海绵膜 (sponge collagen membrane, SCM)、脱细胞真皮(acellular dermis matrix, ADM) 、胶原凝胶三种支架，并将成纤维细胞种植于支架上，观察其成活情况，以期为组织工程皮肤的制备奠定基础。 毕业论文 　　1; 材料与方法 毕业论文 　　1.1; 胶原制备; 取体重250g左右的SD大鼠1只(江西医学院实验动物部)，消毒后将鼠尾切成1.5cm小段，剔除皮毛，抽出尾腱置平皿中。取1.5g剪碎尾腱浸入0.05mol/L 乙酸(西安化学试剂厂)，置4℃冰箱中，并不时摇动，48h后，移入灭菌离心管中。4000r/min离心30min，吸取上清液，按100mL上清液加5g NaCl的比例加入NaCl晶体，可见多量沉淀析出，再次1000r/min离心10min，弃去上清液，所得沉淀即为胶原。经冷冻干燥后称重，保存于4℃冰箱中备用。 毕业论文 　　1.2; SCM的制备 将提取的胶原重新溶解于0.05mol/L乙酸中，制成2.5g/L的胶原溶液。将6硫酸软骨素C(Ch6S，美国Sigma公司)溶液滴加于胶原溶液中，搅拌混匀，Ch6S的终质量浓度为80g/L。将上述溶液倒入平底培养皿中，厚约2-3mm；放入-30℃的冰箱内预冻4h以上。将预冻后的胶原快速转入真空干燥机内，真空冷冻干燥36h。待样品温