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种子纯度室内检验
第一节 种子纯度检验概述 一、种子纯度的概念及其检验的意义 1.种子纯度的概念(?) 种子的真实性是指一批种子所属品种、种或属与文件描述(description)是否相符。 种子纯度(variety purity)是指个体与个体之间在特征特性方面典型一致的程度,用本品种在供检样品中所占的百分率。 异型株(off-type plant)。异型株是指一个或多个性状(特征、特性)与原品种的性状明显不同的植株。 品种纯度检验(verification of cultivar)对象包括(?) 常规品种(variety) 杂交种(hybrid seed )开放授粉品种(open pollination variety),品种纯度检验的对象可以是种子,幼苗(seedlings)或较成熟的植株。 田间检验、室内纯度检验、田间小区种植检验。 2.种子纯度检验的意义 1、品种的真实性和纯度检验,种子质 量评定 2、品种登记管理、 3、品种产权保护 4、品种亲缘关系和遗传多样性研究 二、种子纯度检验方法概述 1、品种形态鉴定; 2、物理化学特性鉴定; 3、生理生化鉴定; 4、细胞学方法; 5、分子生物学鉴定。 1、形态鉴定 (1)种子形态鉴定 依据种子的外部或内部的形态特征以区别不同品种。这一方法主要用于种子体积较大,形态性状丰富的作物。检测速度快、受主观影响较大。 这一技术与计算机识别相结合对品种真实性和纯度进行快速测定,可以消除主观影响(Chuang等1990) 2. 幼苗形态鉴定 检测对象为7-30天的幼苗,不同作物需要的发芽天数不同。禾谷类种子主要依据芽鞘颜色,双子叶植物主要依据子叶的形状、颜色,胚轴的颜色,胚轴上茸毛的多少,真叶的形状、颜色,边缘缺刻的有无等。由于依据的性状较少检测结果不太准确。 3. 植株形态鉴定 是在整个作物生长期间,特别是穗花期根据植物各器官的大小、形状、颜色,对品种进行鉴定。这一方法所依据的性状多,测定结果准确,在目前仍然作为仲裁测定方法,但测定时间较长,一般为一个生长周期。 2、物理化学法 (1)物理特性鉴定 根据品种某些物理特性的差异进行鉴定。目前最常用的是荧光测定,主要用于区分燕麦及十字花科作物品种,应用种子或幼苗在紫外光照射下发生不同颜色的荧光来鉴定品种。这一方法局限性较大,结果不太准确,但测定速度快,一般十几分钟。 常用的方法有:苯酚染色法 ;漂白水处理法。 苯酚染色法 Walls(1965) 利用苯酚法区分小麦品种。根据小麦种子在种皮或颖壳内化学物质的不同,与苯酚反应时产生不同的颜色,可分为不染色、浅褐色、褐色、深褐色、黑色五类。Csala(1972) 研究了苯酚法检测小麦品种的反应机制。Benerjee等(1977) 对苯酚法检测小麦品种进行了改进。Jaiswal(1995)用改进的方法苯酚结合CuSO4,Fe2(SO4)3、NaOH和Na2CO4可进一步引将同一类颜色的水稻品种再进行区分。 漂白水处理法 利用漂白水处理高梁种子,根据处理后种子的颜色区分不同品种。单宁含量高的品种被处理后呈黑色,单宁含量低的品种呈浅色或无色。 3、生理生化学鉴定 在品种鉴别中生化技术目前主要分为电泳技术、色谱技术和免疫技术三大类,电泳技术根据电泳对象又可分为同工酶电泳和蛋白质电泳。 (1)同工酶电泳的应用 利用同工酶电泳,到目前已经研究的作物有: 小麦(wrigly, 1974;Jaaske, 1980),玉米(杨太兴,1979;Cardy 1982;Smith 1984),水稻(颜启传,1984),棉花(Agranral, 1988);西红柿(Vodenicharova, 1993; Mather 1993),甜椒(漆小泉,1994),大白菜(秦智伟,1994;Park, 1995)。 除利用普通电泳外,O’Neill(1995)利用等电聚焦电泳对十字花科的相关种进行分析。Varier (1992)将同工酶等电聚焦电泳用在谷子上。 同工酶鉴别品种存在的问题是: ①多数种子需要发芽,由于种子发芽的速度不同所以造成个体间的差异,容易引起误差。 ②同工酶的提取、电泳等多数需要在低温下进行,增加了电泳操作和电泳技术推广的难度。 ③同工酶存在时期特异性和器官特异性,在测定时需严格按一定程序操作,否则重演性低。 由于同工酶分析存在上述不利因素,在电泳法进行品种鉴别时需首先
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