生物大分子波谱学原理吴季辉.PPT

间接维正负频率区别 生物大分子波谱学原理 吴季辉 幅度调制信号在t1期间的进动频率有正负两个频率，分别来自演化期的升降两个密度算符成分，其相干阶分别为正或负，也就是说要得到幅度调制信号，所选择的相干传递途径必须包含演化期正负两种相干阶； 而相位调制则不然，在演化期只有一种频率 间接维正负频率区别 生物大分子波谱学原理 吴季辉 相位循环 生物大分子波谱学原理 吴季辉 相位循环的例子 生物大分子波谱学原理 吴季辉 相位循环的例子 生物大分子波谱学原理 吴季辉 相位循环的例子 生物大分子波谱学原理 吴季辉 相位循环的例子 生物大分子波谱学原理 吴季辉 相位循环的例子 生物大分子波谱学原理 吴季辉 相位循环的例子 生物大分子波谱学原理 吴季辉 相位循环的例子 生物大分子波谱学原理 吴季辉 相位循环的例子 生物大分子波谱学原理 吴季辉 相位循环的例子 生物大分子波谱学原理 吴季辉 相位循环的例子 生物大分子波谱学原理 吴季辉 相位循环的例子 生物大分子波谱学原理 吴季辉 生物大分子波谱学原理 吴季辉 相位循环 COSY 生物大分子波谱学原理 吴季辉 COSY(correlated spectroscopy),是人们发明的第一种二维谱，同时也是研究蛋白质的最有用的二维谱之一。二个有J偶合的核在COSY上可产生一个交叉峰，由于蛋白质（包括多数其他有机物）中有J偶合意味着这两个核最多通过3个共价键连接，所以COSY谱对于分子结构的拓扑连接可提供非常有价值的信息。 COSY 生物大分子波谱学原理 吴季辉 COSY：脉冲序列分析 生物大分子波谱学原理 吴季辉 第一项为纵向磁化，第二项为多量子项，均不能被观测到； 第三项仍然是第一核的横向磁化，在检测期的频率同演化期类似，均是第一核的，对应于对角峰； 第四项是第二核的反向磁化，在检测期的频率为第二核的化学位移，与演化期不同，对应于交叉峰，这是二维谱最有意义的峰。 COSY：脉冲序列分析 生物大分子波谱学原理 吴季辉 COSY 生物大分子波谱学原理 吴季辉 COSY的交叉峰为反相峰，这一点非常重要，决定了COSY型实验采样及处理时需要注意的问题。而交叉峰与对角峰在相位相差90度，对于谱图在对角线附近的质量有重要的影响。 梯度场 生物大分子波谱学原理 吴季辉 (3) 梯度场 相位循环有几个缺点： 对仪器的稳定性要求高 实验时间延长 动态范围加大，尤其对非标记样品的异核实验 利用梯度场可克服这些缺点。好的设计可以在一次采样中完成信号的选择，而不是象相循环那样靠两次或更多次采样相加或相减来选择信号。 梯度场 生物大分子波谱学原理 吴季辉 a 梯度场硬件： 能产生足够强，高度线性，重复性好的静磁场梯度，通常有Z向梯度和三维梯度两种，现代谱仪的梯度场线圈的屏蔽性能好，梯度场作用后的恢复时间短，对锁场的影响比较小。一般商品谱仪可产生的梯度可达50-60Gauss/cm 梯度场 生物大分子波谱学原理 吴季辉 梯度场 生物大分子波谱学原理 吴季辉 梯度场 生物大分子波谱学原理 吴季辉 随着脉冲时间的延长，总磁化强度衰减并趋于0，梯度场强度越大，衰减越快。通常5mm样品管若装样0.45?l,样品高度约3.25cm,若梯度场强度为30G/cm,则作用0.77ms即可使剩余磁化强度下降到原有值的千分之一。通常梯度场脉冲为成形脉冲，这是为避免过快的磁场变化对梯度线圈产生太大的力矩。不同形状的梯度脉冲对磁化强度的衰减有不同的影响。 梯度场 生物大分子波谱学原理 吴季辉 梯度场 生物大分子波谱学原理 吴季辉 梯度场 生物大分子波谱学原理 吴季辉 梯度场 生物大分子波谱学原理 吴季辉 d 梯度场脉冲的应用例子 * 有用信号在Z向时加梯度消除横向信号 * 回波序列中在180度脉冲前后加梯度脉冲以消除180度不准确产生的杂信号 梯度场 生物大分子波谱学原理 吴季辉 梯度场 生物大分子波谱学原理 吴季辉 梯度场 生物大分子波谱学原理 吴季辉 e 梯度场选择同相位循环的比较 相位循环选择信号的关系式中涉及的是脉冲前后信号相干阶的差值；而梯度场选择信号的关系式涉及的是梯度脉冲作用时信号的相干阶本身。 相位循环选择信号有一种周期性，即可同时选择几种信号；而梯度场选择信号无此种周期性，若要同时选择几种信号传递途径只有在几个梯度场强度满足特定的比例时才有可能。 相位循环选择信号依靠几次信号累加实现；而梯度场选择信号在一次采样中实现，这是梯度场的最主要优点。但是梯度场脉冲及脉冲后的稳定延迟需要一定的时间，在梯度场脉冲多的情况下防止不要的信号形成梯度回波也需比较复杂的分析。 间接维正负频率区别 生物大分子波谱学原理 吴季辉 (4) 间接维正负频率区别 相干阶有正负号区别，对应与旋转坐标系中不同的进动方向，区别正负进动