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输血前检测定性试验中临界值验证必要性及方法 　摘　要：对输血前检测常用的酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂的临界（cut-off）值进行验证，判断试剂盒提供的cut-off值设置是否适合。方法：根据试剂盒说明书及相关标准操作程序（SOP）进行各验证项目的检测，统计其结果的均值、标准差，并计算出X±3sd，再与试剂盒提供的cut-off值进行比较，如果该项目的X±3sd接近试剂盒提供的cut-off，则认为该项目试剂盒提供的cut-off是合适的。结果：HBsAg、艾滋病毒抗体（抗-HIV），丙型肝炎病毒抗体IgG（抗-HCV-IgG），抗-TP验证结果为：0.0554、0.0552、0.1753、0.1382，与试剂盒提供的方法计算出的结果有差异。结论：项目验证结果与试剂盒提供的cut-off值相差很远，cut-off值设置是不适合的。 毕业论文 关键词：临界值；定性试验；酶联免疫吸附试验 　　输血前检测项目主要包括乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、人类免疫缺陷病毒抗体（抗HIV抗体）、丙型肝炎病毒抗体（抗HCV抗体）、梅毒抗体（TP）。是临床诊疗过程中最常检测的项目之-。而做这-类检测最为普遍的方法是酶联免疫吸附试验（ELISA）法。如何使实验室的检测结果更准确地反映被检测者的实际情况，实验室面临着巨大的工作压力，除了需要实验室加强人员的培训以外，了解ELISA定性试验中s/co的分布规律、最低检测限及各项目临界值（cut-off值）的验证显得尤为重要。确定合适的cut-off值，对于检测结果的判断、减少假阳性、假阴性具有重要的意义。 　1 资料与方法 　1.1 一般资料：选取非相应疾病感染的标本1 000例均来源于本院临床和体检标本。 　1.2 仪器与试剂：国产洗板机：上海科华产KHBST-36WF，酶标仪：上海科华产KHBST-360，北京万泰生产ELISA检测试剂盒，包括乙型肝炎表面抗原（HbsAg），艾滋病毒抗体（抗-HIV抗体），丙型肝炎病毒抗体IgG（抗-HCV-IgG抗体），梅毒抗体（抗-TP）。 　1.3 方法：按照试剂盒说明书和相关SOP操作。 　1.4 数据处理：各验证项目根据试剂盒说明书及相关SOP进行检测，检测结果统计均值、标准差，并计算出X+3sd。 毕业论文 　2 结果 　各个项目统计结果见表1。 　表1 各验证项目统计结果表 项目 均值 标准差 X±3sd 试剂盒提供CUT-OFF值 合适否 HBsAg 抗-HIV 抗-HCV 毕业论文 抗-TP 论文代写 0.0179 0.0216 0.0148 0.0311 论文代写 0.0125 0.0112 论文代写 0.0535 毕业论文 0.0357 0.0554 0.0552 0.1753 0.1382 0.105 0.124 0.135 论文代写 0.211 论文代写 不合适 不合适 不合适 不合适 论文代写 　　3 讨论 　尽管目前免疫检测已经出现微粒子酶免发光、电化学发光等方法，ELISA法仍然是应用最为广泛的方法。ELISA法定性检测输血前项目具有快速、简便、成本低及可自动化等优点，在各医疗机构得到广泛应用。在ELISA实验中虽然各厂家生产的试剂盒均提供了cut-off值的计算方法，但不同批试剂盒使用相同cut-off值、多年使用同-cut-off值的现象依然普遍存在．这显然是不合理的。各厂家生产的试剂盒生产工艺不同，各批试剂的反应效果不相同，所得的cut-off值应当有所差异。环境温度、加样误差、洗板效果等方面均是影响ELISA检测性能的因素，各实验室应该自行设定适合自己实验室的cut-off值[1]。而且来自感染和非感染人群的样本之间有一个检测结果的重叠区也即实验中的灰区，说明一个实验一般不大可能有完全100%的敏感性、特异性或预测值。所以在选择cut-off值时还应综合考虑敏感性、特异性或预测值。cut-off值的设定方法-般有标准差比率、测定标本对阴性比值、以阴性对照均值±2SD或3SD、百分位数法、双质控、ROC曲线等[1-2]。本实验选用实验室最简便易行的“以阴性对照均值+3SD”的方法对试剂盒提供的cut-off值进行验证，该方法不需要大量的阳性标本，尤其适合像艾滋、丙型肝炎、梅毒等疾病筛查时试剂盒的cut-off值验证。 　通过统计分析，HBsAg，艾滋病毒抗体（抗-HIV），丙型肝炎病毒抗体IgG（抗-HCV-lgG），抗-TP抗体cut-off值验证结果为：0.0554、0.0552、0.1753、0.1382。其结果均与试剂盒cut-off值设置值相差较远