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青天葵组培物超低温保存探究 　【摘要】 　　目的用超低温方法保存青天葵组培物。方法采用单因子比较法、均匀设计法考察生长周龄、冷冻保护剂、预培养时间、降温方式、化冻方式等因素对青天葵组培物超低温保存后细胞生活力的影响。结果青天葵组培物较佳的超低温保存程序为：５ 周龄的组培物，在４ ℃进行低温锻炼１２ ｄ，以１２．５ ％ＤＭＳＯ ＋０．２５％ＬＨ 为冷冻保护剂，在４℃静置处理３０ ｍｉｎ，然后在－１８℃，停留１ ｈ 后投入液氮中保存，材料取出后，在２０℃化冻，无菌洗涤后，再接种，组培物能够存活并继续生长。结论超低温保存方式可以成功保存青天葵组培物种质资源。 【关键词】 青天葵 组培物 超低温保存 　　Abstract：ObjectiveＴｏ ｐｒｅｓｅｒｖｅ the ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｏｆ Nervilia fordii ｕｓｉｎｇ ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ．MethodsＳｕｉｔａｂｌｅ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎ ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ （ －１９６℃） ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ｂｙ ｍｏｎｏｆａｃｔｏｒｉａｌ ａｎｄ ｕｎｉｆｏｒｍ ｄｅｓｉｇｎ.ResultsＴｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｆｉｖｅ －ｗｅｅｋｅｄ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｗｅｒｅ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｍａｔｅｒｉａｌ ｆｏｒ ｃｒｙｏｐ