MafA基因治疗糖尿病探究进展.doc

MafA基因治疗糖尿病探究进展 　 作者：赵勇　王道荣　汤东　李洪波 【摘要】 糖尿病是一种严重危害人类健康的疾病。1型糖尿病主要因胰岛β细胞破坏引起胰岛素绝对缺乏，2型糖尿病患者晚期也以胰岛素分泌严重不足为主，需要外源性胰岛素治疗。MafA蛋白在胰腺中表达，是胰岛素基因转录的有效活化剂。与Pdx-1和Beta2联合作用，MafA基因发挥明显的促胰岛素生成作用。如果能利用MafA基因诱导糖尿病患者体内胰腺外细胞表达胰岛素，替代病变的胰腺β细胞，将极大的改善糖尿病患者的预后。 【关键词】 基因，MafA·基因表达·糖尿病 　糖尿病严重危害人类健康，发病率呈逐年升高趋势。1型和2型晚期糖尿病患者都存在内源性胰岛素缺乏，目前临床上的治疗不能满足重建患者胰岛β细胞分泌功能的需求。人们曾尝试移植胰岛细胞来重建胰腺内分泌功能，但移植排异、免疫抑制的副作用及手术并发症等诸多因素制约了临床的应用和治疗效果。胚胎干细胞和胰腺干细胞一度成为治疗糖尿病的种子细胞，但又受到了取材不便和伦理学的限制。目前发现，MafA基因在Pdx-1、NeuroD等其他基因的联合作用下，能够诱导体外胰岛素分泌，对糖尿病的治疗有重大的意义 1　Maf蛋白的结构和功能 Maf蛋白属于巨噬细胞激活因子（macrophage-activating factor, Maf）家族，由4个包含N末端的酸性转录激活区域（acidic transcription activating domain TAD）的大Maf蛋白（MafA/L-Maf，MafB/Kreisler，c-Maf和NRL）和3个包含bZIP的小Maf蛋白（MafF，MafG和MafK）组成［1-2］。其中MafA蛋白是胰岛素基因转录的有效活化剂［3］。成年哺乳动物体内只有胰腺β细胞表达胰岛素，MafA蛋白的正常表达维持胰腺结构和功能。MafA蛋白通过连接胰岛基因启动区域的顺式作用元件RIPE3b响应由血清葡萄糖水平调节的胰岛素转录［4］。MafA蛋白缺乏的小鼠Pdx-1、Beta2及NeuroD转录因子的表达降低，β细胞与α细胞的比例降低，影响胰岛素分泌［5］。 2　MafA基因在胰岛素转录中的作用 　　胰岛素基因在胰腺β细胞特异性表达，其转录受到循环中葡萄糖水平的调节。有资料报道未被鉴别出的β细胞特异性核因子结合到称为RIPE3b的保守的顺式调控元件，对葡萄糖调节的表达很重要［5-6］。RT-PCR分析显示MafA mRNA只能在晶状体和胰腺β细胞被检测到［7］。MafA蛋白和MafA mRNA受葡萄糖调节，与β细胞核提取物中结合于RIPE3b元件的MafA相一致。在瞬时荧光（素）酶分析显示MafA基因的表达增加了胰岛素启动子活性，同时引发来自MafA的显性负相抑制［7］。因此，MafA基因可能涉及β细胞的功能和糖尿病的发病机制。 　　用MafA基因稳定转染胰岛αTC6细胞，分析来自内源性胰岛素基因表达的研究发现，MafA基因在αTC6细胞异位表达诱导了可检测的低水平的胰岛素2mRNA，而其他可能的MafA应答基因如Pdx-1和胰岛素1没有被有效的活化［1］。此外，胰高血糖素的表达没有受到MafA基因的影响，表明MafA基因不干涉α细胞浓缩的MafB介导的激活作用。并且还发现MafA基因缺乏小鼠的胰岛素1和胰岛素2转录均显著减少［4］。 　　Kajihara等［8］发现磷酸化与MafA基因最大的激活活性有很大的关系，资料显示磷酸化后MafA基因的转录活性和/或在细胞外信号的稳定性发生很大变化。 　　Jeffrey等［9］提出了MafA基因第三区的概念，认为在大鼠、小鼠和人的MafA基因第五侧翼区已经有6个领域的作用被确认，然而只有位于小鼠MafA基因核苷酸-8118和-7750之间的第三区有能力独立表达胰腺选择性β细胞系的报告基因。在哺乳动物中，第三区是最保守的区域。用于第三区的因子可以直接使MafA基因转录至β细胞。Jeffrey等［9］认为，掌握第三区介导的活化，有助于深刻认知那些特殊的或者是新的转录因子在调节MafA基因的转录和胰腺发育过程中的作用，从而了解胰岛素缺乏和糖尿病的遗传缺陷。 3　MafA基因缺乏时胰岛素分泌的调节和机制 　　已有研究证实转录因子MafA是胰岛素分泌和胰岛结构维护的一个重要的调节因子［10］。胰岛素的转录在MafA基因缺乏小鼠中明显减少，但在胰腺中却显示正常水平，主要是因为MafA基因作为转录因子与胰岛素基因的促进因子相关联， MafA基因可以通过调节胰岛素基因的转录来调节血清葡萄糖水平［11-15］。这些结果表明，MafA基因是体内的胰岛素转录重要的调节因子。与同种类型正常胰腺相比， MafA-/-的胰腺中胰岛素水平并没有明显的减少，这种矛盾的观点可以用两种