MMP9及CD15s及胃癌血管生成相关性探究及其临床意义.doc

MMP9及CD15s及胃癌血管生成相关性探究及其临床意义 　 作者：尚培中 朱习琴 苗建军 贾国洪 李晓武 谷化平 【摘要】 目的：探讨基质金属蛋白酶9(MMP9)和唾液酸化Lewis X（CD15s）抗原与胃癌侵袭转移的相关性。方法：采用CD105，MMP9，CD15s进行免疫组化SP法染色，对47例胃癌根治性切除手术标本病理组织切片进行标记，检测CD105的微血管密度(MVD)，并对MVD与MMP9、CD15s的关系进行统计分析。结果：MMP9、CD15s表达都呈阳性的胃癌组织微血管密度高于MMP9和CD15s单阳性及二者均阴性的胃癌组织。结论：MMP9高表达有利于癌组织局部浸润，CD15s高表达有利于癌细胞血行转移，MMP9及CD15s检测对临床诊治胃癌及判断预后具有一定意义。 【关键词】 胃肿瘤；基质金属蛋白酶9；唾液酸；Lewis X抗原 【ABSTRACT】 Objective：To investigate the relationship between matrix metalloproteinases9(MMP9)and sialyl Lewis X(CD15s)antigen in invasion and metastasis with gastric carcinoma.Methods：Expressions of CD105,MMP9 and CD15s monoclonal antibody in 47 cases with gastric carcinoma having radical surgery were evaluated by SP immunohistochemical staining.The expression of microvessel density(MVD)marked with CD105 was detected.Correlation between MVD and MMP9,CD15s was also statistically analyzed.Results：The MVD in both MMP9 and CD15s positive expression was higher significantly than that of MMP9 or CD15s positive expression along,and it was also significantly higher than negative expression of MMP9 and CD15s.Conclusion：MMP9 is a marker for invasion and CD15s is a marker for metastasis in gastric carcinoma. 【KEY WORDS】 Stomach neoplasms；Matrix metalloproteinases9；Sialic Acids; Lewis X Antigen 胃癌的局部浸润和远处转移是影响患者生存的重要因素。近年研究发现，基质金属蛋白酶9(MMP9)和唾液酸化Lewis X（CD15s）在肿瘤侵袭和转移过程中发挥了重要作用。作者采用免疫组织化学方法,用血管内皮细胞特异标志物CD105(Endoglin)测定胃癌组织的微血管密度(MVD)，分析MMP9与CD15s表达在胃癌微血管生成中的作用及关系，并结合临床随访资料,探讨其表达与胃癌侵袭转移及患者预后的关系。 1 资料与方法 1.1 一般资料 随机收集解放军第251医院2004～2006年行胃癌根治性切除术患者的临床资料和手术切除标本47例，均经病理证实。术前均未行化疗及其他抗肿瘤治疗。 1.2 免疫组化染色 每个病理标本作5μm连续切片2张，分别进行苏木精—伊红染色及CD105、MMP9、CD15s免疫组织化学染色。采用SP法，操作及结果判定参照试剂盒说明书。一抗采用鼠抗人CD105，MMP9、CD15s单克隆抗体，二抗生物素化兔抗鼠IgG及DAB显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。 1.3 染色结果判定 先在低倍镜（40×，100×）下全面观察切片以确定肿瘤内血管密度区，再在高倍镜（400×）下计数上述4个不同区域的血管数，取其平均值作为MVD。计数时凡看到单个孤立的或多个紧密排列的内皮细胞，不论有无血管腔,只要和邻近的微血管、肿瘤细胞或其他结缔组织分开，就记为1个微血管数。是否形成明显管腔，或腔内有无红细胞的存在不作为判断标准。但肌层较厚及管腔面积大于8个红细胞直径和血管不计数。癌细胞胞浆内呈棕黄色颗粒者为MMP9、CD15s阳性细胞，切片中癌细胞阳性