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PD-1及其配体在慢性乙肝免疫中作用 　【关键词】 乙肝 免疫 　　HBV特异性T淋巴细胞功能低下与HBV逃避免疫是造成HBV慢性持续感染的原因，T淋巴细胞功能状态决定了病毒是被清除，或是持续感染。T淋巴细胞异常表达某些免疫分子与慢性乙肝(CHB)的发生、发展过程有关。PD-1为近年发现的CD28家族新成员，因其独特的生物学功能而备受关注，已发现其在慢性乙肝免疫应答过程中发挥重要作用，但其具体免疫机制尚需进一步研究[1]。 　　1 PD-1的生物学特性 　　PD-1最初从T细胞杂交瘤2B4.11中克隆得到，认为与细胞凋亡相关而被命名为程序性死亡分子。人PD-1基因定位于2q37，编码分子量约为50 000的免疫球蛋白超家族I型跨膜糖蛋白，其胞外端为IgV样结构域，此结构可能在与配体的结合中起重要作用。PD-1分子的显著特点是其胞浆区尾部含有2个酪氨酸残基，N端酪氨酸残基参与构成免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)，C端酪氨酸残基则参与构成免疫受体酪氨酸活化基序(ITAM)，因此PD-1可介导负性信号。但介导负性信号并不是由N端ITIM而是C端ITAM通过招募SHP-2而实现[2]。其他CD28家族成员都以同源二聚体形式存在，而PD-1以单体形式存在，因其缺乏保守的半胱氨酸。PD-1主要诱导表达于活化的T细胞、B细胞、单核细胞和髓样细胞，但CD4-CD8-胸腺细胞和不成熟的B细胞可组成性表达PD-1。目前的研究表明，PD-1介导抑制信号[3]。 　　2 PD-Ls及其信号转导通路 　　2.1 PD-L1与PD-L2 PD-L1是首先发现的PD-1配体，经同源筛选从胎盘的cDNA文库中获得其cDNA[4]。人的PD-L1基因定位在染色体9q24.2，编码290个氨基酸残基的I型跨膜蛋白，属B7家族成员。人成熟的PD-L1包含有IgV样结构域、IgC样结构域、疏水性跨膜区及胞浆区尾部。胞外区4个保守半胱氨酸残基是Ig样结构中二硫键形成的基础。胞内段一潜在的PKC磷酸化位点可能是信号转导的结构基础。PD-L1广泛地组成性表达于非淋巴组织内如肝脏、胎盘、心脏和骨骼肌，也可诱导表达于活化的B淋巴细胞、T淋巴细胞及树突状细胞上。这种分布形式提示，PD-1介导非淋巴组织内淋巴细胞应答[3,4]。PD-L2是继PD-L1后发现的PD-1又一配体，人的PD-L2同样定位于人9p24.2，与PD-L1转录方向相同,两者仅间隔4.2 kb。PD-L2基因编码含247个氨基酸残基相对分子量约为25 000的蛋白[1]。PD-L2和PD-L1有明显的同源性即34%相同性和48%相似性。IFN-Y可诱导PD-Ll表达上调，而PD-L2却在IL-4和IL-13的诱导下表达。PD-L2分布相对较局限，主要表达于单核细胞并在DC上呈选择性表达[3,5]。 　　2.2 PD-1/PD-LS信号通路 PD-LS/PD-1信号在免疫反应的起始部位和实质器官部位双重抑制T、B淋巴细胞的活化，对维持机体的外周耐受发挥着重要的作用[6]。研究发现，T淋巴细胞表面PD-1和TCR发生配基化后，可抑制Ca2+内流并通过PD-1胞浆区C端ITAM招募SH2酪氨酸磷酸酶-2(SHP-2)，使下游信号分子SyK、磷脂酶-3、磷脂酰肌醇-3激酶和胞外区信号调节激酶等脱磷酸化而失活[6，7]。外源性IL-2能够逆转PD-1的抑制作用，使其恢复结合被抑制的T淋巴细胞的能力,提示被抑制的T细胞保留有对IL-2反应的能力，但CD8 T细胞因其不能产生高水平的IL-2而反应能力相对低下[3，6]。虽然大量研究提示PD-1/PD-LS提供抑制信号，然而,有关该通路的生物学功能仍存争议。一些研究发现，PD-L1和PD-L2似乎为T细胞提供了活化信号。例如有学者发现在PD-L1和低水平anti-CD3刺激下，T细胞并没有增殖低下反而增殖增强并分泌IL-10增加 ;PD-L2协同刺激T细胞增殖甚至比B7-1更有效，而且PD-L2可为分离的幼稚T细胞产生IFN-Y提供正性信号[8]。另外，Julia等[9]利用BALB/c小鼠模型研究PD-LS通路时发现，DC上PD-L1和PD-L2都高表达，用PD-L1 Ig和PD-L2 Ig分别封闭PD-L1和PD-L2,都能促进T淋巴细胞的增殖与IFN-Y分泌。可能是模型种属和技术的差异导致了不同的结果，但也不能排除PD-LS存在第二受体并协同刺激T细胞增殖的可能。 　　3 PD-1信号与CHB特异性免疫应答 　　在HBV慢性感染过程中，机体特异性的免疫功能低下,病毒逃避机体免疫导致慢性持续感染。CD8 T淋巴细胞的数量和功能状态决定着机体的免疫状态。大量研究表明，CHB感染者抗原特异性的T淋巴细胞功能低下，其抗病毒效应要明显低于急性感染者。众所周知，T细胞的活化需要