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胱抑素C 胱抑素C( cystatin C, Cys C) 是一种低分子蛋白质, 相对分子质量小, 能够自由通过肾小球滤过膜, 并在近曲小管几乎完全被重吸收, 不再重新回到血液循环中, 同时, 肾小管也不分泌Cy s C。人体所有有核细胞均以恒定的速率产生胱抑素C，其血清浓度与肾小球滤过率密切相关。在肾功能不全、肝硬化、肿瘤等多种疾病中，能够很好地替代血清肌酐、肌酐清除率而成为新的可以反映GFR的理想标志物。而且其浓度几乎不受炎症、年龄、性别和病情变化的影响。因此, Cys C 作为一种更为理想的反映肾小球滤过率( GFR) 的灵敏标志物日益受到临床的重视。随着Cys C 在临床上的应用, 它的测定方法也越来越多、越来越成熟。按原理可以分为两类，一类是非均相法：单向免疫扩散法（RID），放射免疫测定法（RIA），荧光免疫测定法（FIA），酶免疫测定法（ELISA）；一类是均相法：颗粒计数免疫测定法，颗粒增强透射免疫比浊法（PETIA），颗粒增强散射免疫比浊法（PENIT）。目前，有专利发明出均相溶胶颗粒型胱抑素C测定试剂盒和不同构造的胱抑素C干式免疫检测试纸条。现就这些测定方法介绍如下。 一、生物学特性 胱抑素C( Cystatin C) 一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂,也被称为γ-微量蛋白及γ-后球蛋白，广泛存在于各种组织的有核细胞和体液中,编码胱抑素c的基因位于人类第20号染色体短臂由122个氨基酸组成，带正电荷，等电点为9.3，是一种碱性非糖化的低分子蛋白质，相对分子质量为13 300c, 能够自由通过肾小球滤过膜,属于Ⅱ型胱抑素基因家族，在合成后短时间内即被分泌入血。Cys C在体内产生速率恒定，血浆Cys C浓度不受年龄、体重、饮食、药物和炎症、肿瘤等病理因素的影响，因此被认为是评价肾小球滤过率的良好标志物。 二、胱抑素C的测定方法 非均相法 单向免疫扩散法（SRID） 1979年建立，其原理是利用可溶性抗原与相应抗体在凝胶中扩散时接触，在恰当的位置形成肉眼可见的沉淀或沉淀环。根据沉淀的多少或沉淀环的大小来计算其胱抑素c的含量。但这种方法由于其灵敏度差，测定时间长，存在较多的人为因素，操作复杂，检测限差而很少有人使用。 放射免疫测定法(RIA) 原理是利用标记抗原与待测抗原竞争有限抗体或特异性结合点的抗原量来测定其含量。该法具有灵敏度好，结果准确，检测限低(1．3ttg／L)，试剂成本低等优点。但其存在放射性污染，操作不方便，检测时间长，试剂具有半衰期，保存时间短，每次操作都要做标准曲线等缺点。 荧光免疫测定法（FIA） 该法是由CoUe等u21在固相支持物上包被已知抗体或抗原用以捕捉待测抗原或抗体，再用荧光标记抗体进行检测，通过荧光分光光度计测量荧光强度，推算待测物质的浓度。该法具有灵敏度好，结果准确，测定快速，检测限低(1ktg／L)的优点。缺点是需要贵重仪器，测定成本高。 酶联免疫测定法(ELISA) 在1979建立，1995年达到成熟。原理是将待测抗原或抗体通过吸附特异性抗体或抗原促使固定于支持物表面，再用酶标抗体或抗原的酶在液相中催化底物显色，来测定待测抗原或抗体的含量。该法由于其试剂成本较低，又不要贵重仪器，已有很多实验室在使用，但依然不适合做急诊测定。 均相法 颗粒计数免疫测定法 1994年报道了该法，它具有检测速度快、变异系数小、误差小的优点，而且易于实现自动化，但由于检测限太高为150mg/L，而限制了它的使用。 颗粒增强透射免疫比浊法(PETIA) 1994年报道该法，其原理是样本中的胱抑素C与胶乳颗粒增强的抗胱抑素C抗体特异性反应，形成免疫复合物，在特定波长处检测其吸光度的变化，其变化程度与样本中的胱抑素C的含量成正比。该法检测范围：0．13—7．80mg/L，精密度：批内CV3．9％，批间CV4．8％ 颗粒增强散射免疫比浊(PENIA) 1997年报道该法，其原理是将总源抗人Cystatin C多克隆抗体标记在聚苯已烯胶乳颗粒上，采用胶乳颗粒增强的免疫散射比浊度法来测定。检测范围0．23—7．25m#L，回收率为95％～109％，批内CV3．1％，批间CV4．5％，HB8．og／i．，，胆红素488tanol／L，TG23mmol／L，类风湿因子2 000KIU／L，骨髓瘤异常蛋白41∥L，均不受影响。 专利发明 均相溶胶颗粒型胱抑素C测定试剂盒 其原理为：吸附有胱抑素C抗体的大小适中、均匀一致的胶体金溶胶颗粒，当遇到相应抗原（胱抑素C）时，由于抗原抗体的大小适中、均匀一致的胶体金颗粒，当遇到相应抗原（胱抑素C）时，由于抗原抗体的相互作用使吸附抗体的胶体金颗粒发生凝聚。金颗粒凝聚后颜色由红变蓝，在波长540nm处吸光度会逐渐降低。而这种降低的程度与胶体金颗粒凝聚的程度呈正比，也与检测抗原量