慢性牙周炎经微波治疗后龈沟液中弹性蛋白酶水平变化.docVIP

慢性牙周炎经微波治疗后龈沟液中弹性蛋白酶水平变化 　【摘要】 目的：观察龈沟液(gingival crevicular fluid,GCF)中弹性蛋白酶(elastase，EA) 在牙周基础治疗+微波治疗后的变化。方法：用滤纸条的袋内取样法取5例患者一侧10个牙位的微波治疗+基础治疗的GCF样本，取对侧10个牙位的基础治疗的GCF样本，以底物检测法测定其中的EA水平。结果：基础治疗+微波治疗后的EA水平较单纯的基础治疗显著下降（Plt;0.01）。结论：微波治疗可以降低慢性牙周炎病人的GCFEA水平，对牙周炎有确切的治疗作用，可以在临床中推广应用。 【关键词】 龈沟液；弹性蛋白酶；慢性牙周炎 龈沟液(gingival crevicular fluid,GCF)中酶的成分变化正逐渐成为评价牙周炎症的重要指标，国内外许多学者对牙周炎病人龈沟液中酶的水平进行检测，提出了酶与牙周炎的关系，而且利用龈沟液中酶的水平变化对牙周炎进行客观评价[1～5]。龈沟液中的弹性蛋白酶(elastase,EA)主要源于中性多形核白细胞(polymorphonuclear leukocyte,PMN),它能广泛地破坏牙周结缔组织和骨组织,与牙周组织的活动性破坏密切相关。龈沟液中EA水平反映牙周组织的炎症破坏程度，可作为评价疗效的客观指标[1]。牙周炎病人经牙周基础治疗后临床指标显著改善，EA水平下降[1]。微波作用于机体某一部位，产热局限，热分布均匀，对组织发挥良好的热效应和生物效应。临床上有利用微波治疗牙周炎的报道[6,7]，取得了良好效果。本研究比较龈沟液中EA在基础治疗+微波治疗与单纯的基础治疗中的变化，为微波治疗牙周炎提供理论依据。 1 资料和方法 1.1 一般资料 从河北北方学院附属第一医院口腔科选择慢性牙周炎患者5例，男2例，女3例，年龄32～67岁。患者全身健康,1年以上未做过牙周治疗,3个月内未服用抗生素、非甾体类药物及其他可能影响白细胞的药物,妇女未妊娠。从每例患者口腔内选不相邻的邻面颊侧牙周炎位点（探诊深度≥4mm）3～8个，根尖片显示邻面牙槽骨有不同程度的吸收。首诊时对患者做口腔卫生指导和全口洁治及深部刮治等牙周基础治疗。次日复诊，对左侧患牙的牙周组织行微波治疗，治疗功率28W，辐射器直径6cm，据面部约1cm，可前后稍移动，每次20min，治疗2周。右侧患牙不作微波治疗作为对照组。微波治疗结束2周后复诊取GCF样本。 1.2 收集GCF样本并记录临床指标 患者清水漱口，用探针去除龈上菌斑，隔湿取样牙齿，将滤纸条放在该牙颊侧牙周袋内，直到遇轻微阻力停止，留置30s后取出（若滤纸条上有血，则弃去，重新选牙、取样），10s后在同一位点再次取样，用龈沟液测量仪测定所取龈沟液的体积后立即将滤纸条置于盛有200μL的EP管中，置-20℃冰箱内保存待用。取样后记录探诊深度（probing depth，PD）、附着丧失（attachment loss，AL）情况。对每组的10个位点进行对比。 1.3 弹性蛋白酶活性的检测——底物法 所有的样本集中于1d取出，室温下解冻，每管加含0.1%Tween 20 的PBS液(PBST,pH7.4)170μL,采用螺旋震荡器上震荡洗涤，1000r/min离心10min后取上清液。于96孔酶标板中每孔加28μL底物工作液(LPyroglutamylLprolylLvalinepnitroaniline，S2484, 2mmol/L，Sigma 公司)，再于每孔加42μL龈沟液样本，于37℃下恒温孵育2 h后，用BR450酶标仪，在405nm波长下读A值，此A值即代表2h内每样本龈沟液中弹性蛋白酶的总水平，记作Abs(absorbance)/样本。每例患者的二组样本在同一块96孔酶标板上测定。 1.4 统计学处理 采用配对t检验比较二组的EA、龈沟液量、PD及AL。 2 结果 表1 二组样本临床及生化指标的比较注：与基础治疗组相比*Plt;0.01 二组各项临床和生化指标的比较见表1。由表1可见，经牙周基础治疗+微波治疗后，弹性蛋白酶的水平比单纯的基础治疗显著下降(Plt;0.01)，各临床指标均有显著改善(Plt; 0.01)， AL平均增加0.5mm，PD平均减少0.9mm,表明口腔卫生控制良好、炎症明显减轻，GCF量也显著减少。 　 3 讨论 龈沟液中的弹性蛋白酶主要源于中性多形核白细胞，它能广泛地破坏牙周结缔组织和骨组织,与牙周组织的活动性破坏密切相关。和璐等研究表明，牙周基础治疗后，临床指标显著改善，GCF量减少，EA减少，EA可用作疗效判断的客观指标[1]。刘荣坤等报道，炎症部位弹性蛋白酶活性的高低不仅反映PMN在局部的浸润情况，还可提示PMN潜在的致炎作用，P