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用于蔬菜残留耐药基因检测的DNA制备技术
第8 卷 第8 期 食品安全质量检测学报 Vol. 8 No. 8
2017 年8 月 Journal of Food Safety and Quality Aug. , 2017
用于蔬菜残留耐药基因检测的DNA 制备技术
李 娟, 陈 倩*
(北京市疾病预防控制中心营养与食品卫生所/北京市预防医学研究中心营养与食品卫生所/
食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室, 北京 100013)
摘 要: 目的 建立用于蔬菜残留耐药基因(antibiotic resistance genes, ARGs)检测的DNA 制备技术。方法 以
樱桃萝卜、香菜为研究对象, 对商业试剂盒PowerWater® DNA Isolation kit 和PowerPlant® Pro DNA Isolation
kit 中的具体步骤进行改良, 不经细菌分离培养等过程, 提取其可食用部分残留微生物基因组 DNA 。利用
NanoDrop™微量紫外-可见光分光光度计, 检测 DNA 的纯度和产量, 并以 DNA 为模板, 对 16S rRNA、
ARGs(sul Ⅰ、tetM 、mef)进行PCR 扩增, 以验证本研究建立的DNA 制备方法对于后续ARGs 检测抑制物的去
除情况。结果 本研究所制备的DNA(n=5), OD260/OD280 值均在 1.7~1.9 之间, 浓度均为 10 ng/μL 以上。经电
泳检测后, 目的基因的PCR 扩增条带清晰, 且经过序列分析比对证实, 目的基因与以往文献报道的同源性均
达到97%以上。结论 本研究建立的DNA 制备方法, 无需细菌分离培养, 简单、省时, 所获得的DNA 纯净, 为
后续蔬菜残留ARGs 检测等研究提供技术支持。
关键词: 蔬菜; DNA 制备技术; 抗生素耐药基因; 微生物
DNA preparing technologies for the detection of antibiotic resistance genes
from vegetables
*
LI Juan, CHEN Qian
(Department of Nutrition and Food Hygiene , Beijing Municipal Center for Disease Prevention and Control/Beijing
Municipal Center for Disease Preventive Medical Research/Beijing Key Laboratory of Diagnostic and Traceability
Technologies for Food Poisoning, Beijing 100013, China)
ABSTRACT: Objective
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