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(zlh)课题3_分解纤维素微生物分离

【学习目标】 1.能简述纤维素酶的种类及作用。 2.能从土壤中分离出分解纤维素的微生物, 了解这类微生物的应用。 3.能掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。 草食性动物是怎样消化食物中纤维素的? 胃中生活着大量分解纤维素的微生物,能产生纤维素酶,将纤维素分解成葡萄糖 纤维素是一种由 首尾相连而成的高分子化合物,植物每年产生的纤维素能被土壤中的某些微生物分解利用,是因为它们能产生 。对这些微生物的研究与利用,使人们能够利用秸秆等废弃物生产 ,用 处理服装面料等。 纤维素酶 葡萄糖 酒精 纤维素酶 (一)纤维素与纤维素酶 纤维素 纤维二糖 葡萄糖 C1酶 Cx酶 葡萄糖苷酶 1.纤维素酶 (1)组成:一种 酶,它至少包括三种组分,即 、 和 。 (2)作用 复合 C1酶 Cx酶 葡萄糖苷酶 滤纸崩溃法 体会纤维素酶作用的实验: 1 2 纤维素酶水解滤纸试验 (二)纤维素分解菌的筛选 1、筛选纤维素分解菌的方法是______________。该方法可以通过________反应直接筛选。 刚果红染色法 颜色 2、其原理是:刚果红可以与纤维素形成____________,当纤维素被_________分解后,红色复合物无法形成,出现以_____________为中心的________,我们可以通过____________来筛选纤维素分解菌。 红色复合物 纤维素酶 纤维素分解菌 透明圈 是否产生透明圈 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 (分离分解纤维素的微生物的实验流程) (此步可省略) 〖旁栏思考题〗为什么要在富含纤维素的环境中找纤维素分解菌? 在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高 〖旁栏思考题〗将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋进土壤多深? 人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境,使纤维素分解菌相对聚集。将纸埋于深约10cm的腐殖土壤中。 【资料一】土壤取样 1、纤维素分解菌选择培养基属于______(固体、液体)培养基,原因是____________________。 【资料二】选择培养 阅读资料二“选择培养基”,回答以下几个问题: 液体 没有添加琼脂成分 2、该培养基对微生物________(具有,不具有)选择作用。如果具有,其选择机制是 ____________________________ ___________________________。 以纤维素粉为主要碳源,能分解纤维素的微生物可以大量繁殖 具有 3、你能否设计一个对照实验,说明选择培养基的作用? 自变量为培养基的种类,即普通培养基和选择培养基。可用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照。 4、①选择培养的目的是:增加纤维素分解菌的 ,确保能够从样品中分离到所需要的 。 ②选择培养的操作方法:称取土样20 g,在无菌条件下加入装有30 mL培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在 上,在一定温度下振荡培养1~2 d,直至培养液变 。也可重复选择培养。 浓度 微生物 摇床 混浊 【思维激活2】由“选择培养”实验操作过程请你推测纤维素分解菌的异化类型是需氧型还是厌氧型? 由选择培养操作中“将锥形瓶置于摇床上”可推测纤维素分解菌的异化类型为需氧型。 【资料三】刚果红染色法 方法一:先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应 方法二:在倒平板时就加入刚果红 染色法 优点 缺点 方法一 (后加刚果红) 方法二 (先加刚果红) 颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用 操作繁琐,刚果红会使菌落之间发生混杂 操作简便,不存在菌落混杂问题 产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈,有些微生物能降解色素,形成明显的透明圈。 思考:这两种方法各有哪些优点与不足 〖旁栏思考题〗为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物? 在选择培养的条件下,可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖,而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“浓缩”的作用。 指微生物的种类少了,而某些微生物的数量多了 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落

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