HLPC法测定阿莫西林可溶性粉的含量.docVIP

学生课外阅读 任 务 书 文献名称：HLPC法测定阿莫西林可溶性粉的含量 姓名： 唐 彭 学号： 0908401-18 院系： 化学与环境工程院 专业： 生物工程 2011 年 10 月 9 日 HLPC法测定阿莫西林可溶性粉的含量 化学与环境工程院（生物工程） 唐彭（0908401-18） 摘 要： 根据1990年版《中华人民共和国药典》二部中阿莫西林的含量测定,是用分光光度法。该法所用试剂较多,且要求严格,外界条件不易掌握,操作起来较复杂。而本文所介绍的高效液相色谱法,以磷酸二氢钠缓冲液(pH4.4)—甲醇(95∶5)为流动相,在ODS柱上分析,检测波长220nm,外标法;回收率99.89%,在0.4~1.4mg/ml范围内线性良好,r=0.9999。与分光光度法测量结果比较无显著性差异,且简便、快速、准确。 关键词： 阿莫西林;可溶性粉;高效液相色谱 阿莫西林可溶性粉作为抗生素药物,用于革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌引起的感染。采用高效液相色谱法对其进行含量测定,具有快速准确,灵敏度高,获得了较满意的结果。 1 仪器与试剂试药 SPD-10A紫外检测器,LC-10A高压泵、C-R7A数据处理机、CLS-ODS C18色谱柱(5μm,4.6mm×150mm)均为日本岛津公司产品。 阿莫西林可溶性粉,安徽省天柱山兽药厂提供,规格(50g∶5g)以游离酸计,阿莫西林对照品由中国药品生物制品检定所提供,含游离酸86.2%,甲醇、磷酸二氢钠均为分析纯,水为重蒸馏水。 2 试验方法及结果 2.1 色谱条件 流动相磷酸二氢钠缓冲液(pH4.4)—甲醇(95∶5)用前经过滤过、脱气处理;流速为2ml/min;检测波长220nm,进样量10μl。 2.2 线性关系实验 精密称取阿莫西林对照品适量,加重蒸馏水制成含游离酸分别为0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4mg/ml10μl,在上述色谱条件下测定,以进样量面积回归,得阿莫西林方程为Y=1.39×107X+6.7×105 r=0.9999。结果表明阿莫西林在0.4~1.4mg/ml 范围内有良好线性关系(见图1)。 图1 阿莫西林色谱图 2.3 样品含量测定 取本品约700mg,精密称定,置100ml容量瓶中,加重蒸馏水溶解至刻度,照上述色谱条件进样10μl,另取阿莫西林对照品同样操作,按外标法测5批样品的含量(见表1)。 表1 阿莫西林可溶性粉含量 (n=5) 批 号 平均含量(%) RSD(%) 981219-1 10.33 0.15 981219-2 10.41 0.20 981219-3 10.41 0.17 990110-1 9.53 0.22 990110-2 9.20 0.16 2.4 回收率测定 精密称取已知含量的阿莫西林可溶性粉0.5g,加入不同浓度水平的阿莫西林对照品适量,按上述方法测定,结果见表2,平均回收率99.89%,RSD=0.18,n=5。 表2 回收率测定结果 (g,n=5) 样品量 含阿莫西林量 加入对照品量 阿莫西林测定量 回收率(%) 0.5876 0.0607 0.0245 0.0849 99.60 0.5876 0.0609 0.0458 0.1065 99.84 0.4588 0.0478 0.0672 0.1150 100.01 0.5927 0.0565 0.0878 0.1423 98.6 0.5231 0.0481 0.0753 0.1251 101.4 2.5 本法与分光光度法含量测定结果的比较 结果见表3。 表3 两种方法含量测定比较 (%含量,n=5) 批 号 HLPC法 分光光度法 981219-1 10.33 10.23 981219-2 10.36 10.14 981219-3 10.41 10.20 990110-1 9.53 9.21 990110-2 9.20 8.96 结果经t值检验,p0.05,无显著性差异。 3 讨 论 1、阿莫西林系青霉素的衍生物,分子中含有氨基及羧基,在pH4.3~6.0区间,分子的氨基及羧基均离子化,易于洗脱,pH酸移或碱移时则只有氨基或羧基解离,分子离子化程度降低,保留值上升。磷酸二氢钠缓冲液有利于色谱柱键合的稳定性。 2、温度对阿莫西林的出峰时间有影响,随着温度的升高,阿莫西林的出峰时间提前。 3、阿莫西林较难溶于水,室温下溶解度为0.4%,在水中能引起降解,降解时