罗格列酮对肝癌SMMC-7721细胞周期和凋亡影响及其可能作用机制.pdf

中文摘要 的影响，并检测与细胞周期调控相关的细胞因子p27kipl 及Skp2的变化，从而探讨罗格列酮诱导肝癌 SMMC．7721细胞凋亡及对细胞周期调控的可能机制。 方法：对人肝细胞癌细胞株SMMC．7721细胞进行 常规培养。采用逆转录．聚合酶链式反应(reverse chain transcriptionpolymerase y 测SMMC．7721细胞PPARmRNA表达的变化，以 B-actin作为内参照标准，并对扩增产物进行凝胶扫描； IXmol／L5个浓度组 罗格列酮分别取0、0．1、1、10、100 ，其中101．t 间点培养细胞，采用FCM检测不同时间点、不同浓度 罗格列酮对肝癌细胞株SMMC．7721细胞周期和凋亡率 的影响；以Western．blot方法检测不同时间点、不同浓 度罗格列酮对SMMC．7721 p27㈨P及Skp2蛋白表达的变 化，并进行相对定量分析。 结果：1 在PPARYmRNA表达。 2 的Go／G1期比例显著升高(P0．05)，S期比例轻度降低 赖性和剂量依赖性。同时罗格列酮对SMMC．7721细胞 引起了显著的细胞凋亡，由于药物浓度和作用时间不 同，细胞的凋亡率范围从5．15％～17．36％；但低浓度罗 IX 格列酮fO．1mol／L)促进肝癌细胞凋亡作用不明显fP 0．05)，但随着药物浓度的增加，罗格列酮的促凋亡作用 明显增加并且呈时间依赖性和剂量依赖性(P0．05)。 3 中文摘要 3 Westen blot结果显示罗格列酮能明显降低Skp2 蛋白的表达，且抑制作用呈明显时间及剂量依赖性(P 量明显升高，并且呈时间依赖性和剂量依赖性俨 0．05)。 YmRNA表达，位于360 bp处。 著升高，s期比例轻度降低，G2／M期明显降低，使肝癌 细胞停止于Go／G，期，同时罗格列酮对SMMC．7721细 胞引起了显著的细胞凋亡，并且呈时间依赖性和剂量依 赖性。 3罗格列酮能时间及剂量依赖性降低Skp2蛋白及 增加p27kjpl蛋白的表达，表明罗格列酮可能通过上调 p27kjpl和下调Skp2的表达改变细胞周期和诱导细胞凋 产。 关键词：肝细胞癌；PPARy；罗格列酮；细胞周期； 凋亡 4 英文摘要 onEffectsof Study PPARyLigand Experimental oilCells and and RosiglitazonecycleApoptosis its Mechanismin possible Hepatoce¨uIar ， CellLine Carcinoma ABSTRACT the oneof Objective：Hepatocellularcarcinoma(HCC)is commo