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紫外诱变原生质体选育溶菌酶高产菌株的研究-渔业科学进展
第 3O卷 第 4期 渔 业 科 学 进 展 Vo1．30，NO．4
2 0 0 9 年 8月 PROGRESSIN FISHERY SCIENCES Aug．，2009
紫外诱变原生质体选育溶茵酶高产菌株的研究
冯学珍 郑 媛 王跃军 孙 谧 ¨ 于建生 程江峰。
(中国水产科学研究院黄海水产研究所 ，青岛266071)
(。青岛科技大学化工学院，266042)
(。柳州医学高等专科学校药学教研室，545006)
摘要 以1株产海洋溶菌酶活性较高的菌株 (S_12—86)为原始菌株 ，对其原生质体的制备 、再生及
紫外诱变育种进行 了研究。实验所确定的原生质体的最佳制备条件为：菌株 S一12—86培养 18h，溶茵
酶浓度为 1．0mg／ml，在 35℃下，酶解 30min，原生质体形成率为97．6 ，再生率为23．6 。同时实
验所确定的原生质体诱变的适宜条件为：30w 紫外灯下 80crn照射 120S。对大量再生突变株进行
筛选，最终获得 了1株遗传 性能稳定 的菌株 R—J一101，其产酶活力达到 1808U／mg，比原始菌株
(1290U／mg)提高 了4O 。
关键词 海洋溶菌酶 原生质体的制备和再生 芽孢杆菌 诱变
中图分类号 Q557 文献识别码 A 文章编号 1000—7075(2009)04—0090—06
Breedingofahigh lysozymeproducingBacillusstrain
bymutagenesisofprotoplasts
FENGXue—zhen， ZHENGYuan WANGYue-jun SUNMi
YU Jian—sheng CHENG Jiang—feng
(Yellow SeaFisheriesResearchInstitute，ChineseAcademyofFisherySciences．Qingdao266071)
(CollegeofChemicalEngineeringQingdaoUniversityofScienceandTechnology，266042)
(。PharmicDepartmentLiuzhouMedicalCollege，545006)
ABSTRACT Thepreparation，regenerationandUV-mutagenesisofprotoplastsofstrainS-12—86，
whichhadhighlysozyme-producingactivity，werestudied
． Theresultsshowedthattheoptimalcondi—
tionsofthepreparationandregenerationofprotoplastwereasfollows：incubationtimeofthestrainS-
12—86was18h，concentrationsoflysozymewas1．0mg／ml，andtimeofenzymolysiswas3Ominat
35oC．Theratesofformationandregenerationofprotoplastundertheoptimalconditionswere97
． 6
and23．6 ，respectively．Th
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