培养基的准备与灭菌设备-经典.pptVIP

第二章 生物细胞培养基制备过程与设备 第一节 液体培养基的灭菌 灭菌是利用物理或化学方法杀灭或除去物料及设备中生物体的过程。 常用的灭菌方法 二、常用的连续灭菌流程 1.连消塔-喷淋冷却连续灭菌流程 配好的培养基用泵打入连消塔与蒸汽直接混合，达到灭菌温度后进入维持罐，维持一定时间后经喷淋冷却器冷却至一定温度后进入发酵罐。 2. 喷射加热-真空冷却流程 培养基用泵打入喷射加热器，以较高速度自喷嘴喷出，借高速流体的抽吸作用与蒸汽混合后进入管道维持器，经一定维持时间后通过一膨胀阀进入真空闪急蒸发室，因真空作用使水分急骤蒸发而冷却到70-80℃左右，再进入发酵罐冷却到接种温度。 3. 板式换热器灭菌流程 采用了薄板换热器作为培养液的加热和冷却器，培养液在设备中同时完成预热、灭菌及冷却过程，蒸汽加热段使培养液的温度升高，经维持段保温一段时间，然后在薄板换热器的另一段冷却，从而使培养基的预热、加热灭菌及冷却过程可在同一设备内完成。 分批灭菌过程与设备 全过程包括升温、保温、降温三个过程。 第二节 淀粉质原料的蒸煮与糖化 淀粉糖化的目的，是通过糖化酶将淀粉、糊精进行水解。糖化的作用也就是把溶解状态的淀粉、糊精转化为能够被生物细胞利用的可发酵性物质（当然也有不发酵性物质生成，这主要是由于转移葡萄糖苷酶等的作用），降低醪液的粘度，有利于酵母的发酵和酵液的输送。 一、连续蒸煮糖化 二、间歇蒸煮糖化 一、连续蒸煮糖化 连续蒸煮糖化工艺料液连续流动，在不同的设备中完成加料、蒸煮、糖化、冷却等不同工艺操作，整个过程连续化。 （一）蒸煮糖化设备 1．罐式蒸煮设备 2．柱式连续蒸煮设备 特点是高温快速蒸煮，预热后的粉浆经泵送入加热器，被高压蒸汽从相对方向喷射进行瞬间高温蒸煮，然后流入缓冲器，再均匀地流入后面几根柱子内，在一定温度下继续蒸煮。第一根柱子内装有锐孔，第二根柱子内装有挡板，料液经过锐孔和挡板缺口时，流速增快，压力发生骤变，原料细胞膜突然膨胀而部分破裂，细胞内容物流出，得到充分蒸煮。但柱子容积不大，料液在里面维持的时间不长，为使原料的淀粉糊化，一般在柱子后面再连接1~2个后熟器，使料液在一定温度下继续维持一定时间，保证淀粉糊化比较彻底。 3．管式连续蒸煮 管式连续蒸煮是通过加热器和管道来完成的，物料先通过加热器在较高的温度和压力下，使物料和蒸汽在短时间内就充分混合，完成热交换，然后混合的高温物料再通过管道转弯处产生压力的间歇上升和下降，使醪液发生收缩膨胀，减压汽化，冲击等使淀粉软化和破碎，进行快速蒸煮。 主要特点是高温快速，糊化均匀，糖分损失少，设备紧凑，易于实现机械化和自动化操作 4．真空冷却器 真空冷却指的是醪液在一定的真空度下（即醪液进入负压状态）醪液本身产生大量蒸气（二次蒸气），并被抽出，这样便消耗了醪液大量的热量，因而醪液很快冷到与真空度相应的温度，这种醪液冷却法就称为真空冷却。 5．糖化罐 （1）连续糖化罐 连续糖化罐的作用是连续地把糊化醪与水稀释，并与液体曲或麸曲乳或糖化酶（酶制剂）混合，在一定温度下维持一定时间，保持流动状态，以利于酶的活动。 二、间歇蒸煮糖化 间歇糖化法在整个糖化过程中主要有前冷却、糖化、后冷却以及将糖醪送入发酵罐等操作，间歇糖化的生产操作是在一个具有搅拌和冷却装置的糖化锅内完成的。 间歇糖化法的工艺流程：蒸煮醪→糖化锅＋加水＋冷却（120℃至60℃）＋加酸十加曲十糖化十冷却（60至30℃）→发酵罐（或酒母罐） 第三节 纤维素和半纤维素的水解 可以利用的生物质资源很多，包括各种农业残余物 、林业残余物、专门栽培的作物以及各种废弃物。这些木质纤维材料完全可望将它们降解转化为糖类，并生物加工成有用的物质，如生物能源等。 一、蒸汽爆裂法 二、稀酸预处理法 三、酸酶水解法 一、蒸汽爆裂法 向装有植物纤维物质的压力罐通入高压蒸汽，使罐温度达到200-240℃左右，原料中的半纤维素会迅速分解释放出有机酸，发生自水解作用而可溶化。细胞间的木质素熔化，并发生部分降解，变得易为热水、有机溶剂或稀碱抽提。加上突然减压爆碎的机械分离作用，使植物细胞间质或细胞壁变疏松，细胞游离，纤维素的可酶解性明显增强。蒸汽爆碎技术的成败在于精确控制处理强度（蒸汽温度和处理时间）和处理的均匀度。控制不当，半纤维素等未充分降解或降解产生的单糖被进一步降解破坏，得糖率往往会低于理论值的65% 。 二、稀酸预处理法 优点：稀酸处理既对纤维物料进行预处理，又可以得到半纤维素水解的糖液。 缺点：糖的得率较低，能量消耗较大（因为要在高温高压下进行）和仍需要耐酸材料（比浓酸要好些）。 过程：第一阶段在较温和的条件下（100℃）左右进行，使半纤维素分解，所得半纤