短双链RNA对鸡胚盘细胞外源绿荧光蛋白基因表达地影响.PDFVIP

动物学报 　50 (2) :302 - 307 , 2004 A cta Zoologica S inica 　　　　　 　 短双链 RNA 对鸡胚盘细胞外源绿荧光蛋白基因 表达的影响 孟　和　陈学辉　王起山　崔芳岩　潘玉春 上海交通大学农业与生物学院 , 上海 201101 , China 摘 　要 　RNA 干扰 ( RNA interference , RNAi) 作为一种特异性沉默基因表达的方法 , 正在成为研究基因功能、 胚胎发育及病毒性疾病治疗的重要工具。为了了解 RNA 干扰在禽类中的作用情况 , 实验将体外转录合成的绿荧 光蛋白短双链干扰 RNA ( si GFP) 和 3磷酸甘油醛脱氢酶短双链干扰 RNA ( si GAPDH) 分别同绿荧光蛋白 ( ) ( ) TM Green fluorescent protein , GFP 表达载体 p EGFPC1 Vector 用脂质体转染试剂 Lipofectamine 2000 共转染鸡 胚盘细胞 , 并于转染后 36 h 在荧光显微镜下观察转染和干扰效果。对细胞绿荧光蛋白表达率的方差分析结果显 示 , 不同处理组间差异达极显著水准 , 其中 GFP 组和 GFP + si GAPDH 组均同 GFP + si GFP 组差异极显著 , GFP 组同 GFP + si GAPDH 组差异不显著。实验结果说明 , si GFP 能特异、有效地敲低细胞绿荧光蛋白的表达。同线 虫、真菌、拟南芥、水螅、锥虫、涡虫、果蝇、斑马鱼、小鼠等其它生物体一样 , 鸡胚盘细胞中也存在短双链 干扰 RNA (siRNA) 特异性沉默基因表达的 RNA 干扰机制 [动物学报 50 (2) : 302 - 307 , 2004 ] 。 关键词 　RNAi 　siRNA 　鸡胚盘细胞 　GFP 　GAPDH Inhibition of green fluorescent protein gene expression in chicken blastoderm cells by siRNA MEN G He , CHEN XueHui , WAN G QiShan , CU I FangYan , PAN YuChun College of Agriculture and Biology , Shanghai Jiaotong University , Shanghai 　201101 , China Abstract 　RNA interference ( RNAi) has developed into a powerful tool for studying gene function , embryonic develop ment and virosis therap y which can be capable of silenced the expression of special genes. In order to identify the mecha nism of RNAi in the birds , The small interference RNA of GFP ( si GFP) and GAPDH ( si GAPDH)