核酸提取及常见问题分析——王伟.pptVIP

DNA提取常见问题 实验材料不佳或量少 破壁或裂解不充分 沉淀不完全 洗涤时DNA丢失 尽量选用新鲜（幼嫩）的材料 高温裂解时，时间适当延长；低温沉淀时，也要延长沉淀时间 加辅助物，促进沉淀 洗涤时，最好用枪头将洗涤液吸出，勿倾倒 问题三：DNA提取量少。 对 策 原因 加了抗凝剂的血液刚开始和普通血液应该没什么区别吧， 静置后，血细胞下沉，留上层为淡黄色的液体为血浆，下面颜色深的为血细胞 * 血凝块前期破碎程度越高，提取基因组就越容易！ * 红细胞裂解充分的现象： 得到的沉淀应为白色沉淀或淡粉色沉淀。有时血液需要进行两次裂解，注意第二次加入裂解液后需要将沉淀votex彻底混匀。 * 核酸提取及常见问题分析 C组 王伟 2012.7.27 　　　核酸是遗传信息的载体，包括DNA和RNA,是最重要的生物信息分子，是分子生物学研究的主要对象，因此核酸样品的质量将直接关系到实验的成败。 核酸的分离与纯化 核酸在细胞中总是与各种蛋白质结合在一起的。核酸的分离主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子分开。 在分离核酸时，应遵循两个原则：一是保证核酸一级结构的完整性，因为完整的一级结构是核酸结构和功能研究的最基本的要求；二是尽量排除其它分子的污染，保证核酸样品的纯度。 核酸分离与纯化的过程一般都包括了材料的选择、核酸的释放、核酸与其它生物大分子的分离、核酸的纯化