MLPA检测原理及应用-罗娥娜 20150118.pdf

MLPA检测原理及应用 ——罗娥娜 2015-01-18 主要内容 ☆MLPA技术简介 ☆MLPA技术工作流程 ☆MLPA应用领域 ☆MLPA技术简介 MLPA （multiplex ligation-dependent probe amplification ），是于2002年由Schouten等首 先报道，是近几年发展起来的一种针对待检 DNA序列进行定性和半定量分析的新技术。 该技术高效、特异，在一次反应中可以检测 50个左右的核苷酸序列突变，目前已经应用 于多个领域、多种疾病的研究。 传统PCR与MLPA技术的差别 传统PCR与MLPA技术的差别 MLPA探针构造 通用引物 通用引物 3 ’ 5’ 特异识别序列 填充序列 3 ’ 5’ 目标序列 主要内容 ☆MLPA技术简介 ☆MLPA技术工作流程 ☆MLPA应用领域 ☆MLPA技术工作流程 1、变性2、杂交 PCR 下游引物 PCR 上游引物 5’ 填充序列 (对于不 同探针长短不同 杂交序列 5’ 5’ …… 3’ 目标序列A 5’ 3’ 目标序列B 5’ 3’ 目标序列N 5’ 3、连接 5’ 3’ 目标序列A 5’ 5’ 3’ 目标序列B 5’ …… 5’ 3’ 目标序列N 5’ 4、扩增 5’5’ 目标序列A 3’3’ 5’5’ 目标序列A 3’3’ 5’5’ 目标序列A 3’3’ 5’5’ 目标序列A 3’3’ 5’ 目标序列B 3’ 5’ 目标序列B 3’ 5’ 目标