果蝇的培养与果蝇性状形态的观察.docxVIP

实验一：果蝇的培养及果蝇性状形态的观察实验目的、掌握果蝇的饲养方法、了解果蝇的生活习性、学习辨认果蝇的雌雄个体、学会观察果蝇的某些特殊性状实验原理果蝇（fruit fly，vinegar fly ）广泛存在于全球温带及热带气候区，在果园、菜市场等地皆可见其踪迹，目前已发现1000多种。 果蝇以酵母菌为主要食料，能发酵的水果或植物基质，都可用作果蝇的饲料。黑腹果蝇(Drosophila )：双翅目，果蝇属。 特点：生活史短，每12天左右即可完成一个世代；饲养容易，以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖；繁殖能力强，每只受精的雌蝇可以产卵500个左右；突变型多，突变性状多，多数是形态变异，容易观察；染色体少、个体小，是一种很好的遗传学实验材料，是一种模式生物。在25摄氏度的环境下，果蝇从出生到成熟共需要十天。果蝇是完全变态昆虫，生活周期可分为4个时期：卵、幼虫、蛹和成虫。最适培养温度20～25℃，温度越高，生长越快，但高于30℃不育甚至死亡。卵：白色，椭圆形，长约 0.5mm，前端背面伸出一触丝，附着在食物上。幼虫：一龄——二龄——三龄，三龄体长4-5 mm，幼虫头尖尾钝，头上有一黑色钩状口器。蛹：化蛹前三龄幼虫停止摄食，爬到相对干燥的瓶壁上，形成菱形的蛹，形状由淡黄、柔软逐渐硬化为深褐色。成虫：刚羽化的果蝇虫体较肥大，体表呈半透明，颜色逐渐加深，硬化。实验材料及器材培养箱、高压灭菌锅、电磁炉、搪瓷杯、玻璃棒、培养瓶、海绵塞、酒精棉球、毛笔、麻醉瓶、白纸板，电子天平、镊子、解剖镜、显微镜。 乙醚、酒精、4ml丙酸、5.6克酵母粉、6克琼脂、68克玉米粉、52克白糖、600ml水（5人一组）。三种不同性状的果蝇：三隐型，野生型，黑体型（各数只）。实验方法及步骤培养瓶的清洗及灭菌、每个人取12个培养瓶，并配上12个松紧度合适的塞子。将培养瓶清洗干净，沥干水。（若找不到合适的塞子，则自己用纱布和棉花制作）。、将沥干水的培养瓶重新塞上塞子，用橡皮筋以四个为一捆捆起来，在有塞子的一端再用报纸捆一遍。用老师准备好的方形小纸片折15个帆的形状，装入信封后将信封折叠封好口。、在弄好的三份培养瓶的报纸上写上名字，在信封上写上名字，放入指定的篮子内，由老师一起拿去进行高压灭菌。 培养基的配制及分装、取一个大的玻璃瓶，用电子天平称取68克玉米粉，加入300ml的水，搅拌使玉米粉溶解，调成糊状。、取一个搪瓷杯，用电子天平称取6克琼脂，加入300ml水，放在电磁炉上加热并搅拌，再称取52克蔗糖加入搪瓷杯中，搅拌到沸腾后将已溶解的玉米粉缓慢加入其中，搅拌至沸腾。掌握好培养基的粘稠度，因为如果培养基过稀则果蝇无法生存，过稠则后面倒不下去。（注意：加热过程中，杯中物可能会溅出，所以要控制好火候。）、待到其稍冷却后向搪瓷杯中加入称量好的5.6克酵母粉和4ml丙酸。、将高压消毒后培养瓶取出，将配制好的培养基倒入每一个培养瓶中，每一个培养瓶中倒入15-20ml一个容纳至少需8瓶。注意：培养瓶的塞子不能放在桌子上，要拿在手上或者倒放在原来用来包扎的报纸上。另一点，在到培养基的过程中要小心，不能倒在培养瓶的上部管壁上，如果倒在上部管壁上，必须要用酒精棉擦拭干净。并且倒的速度要快，因为等其冷却后琼脂使其凝结，无法倒下。、待培养基全部冷却凝固了以后再用镊子向每个培养瓶中插入制作好的小帆。、每个人用一个装了培养基的瓶子去向老师换一个已经接种了果蝇的培养瓶。然后再将所有培养瓶按照原来的方式捆好，每个组一个篮子将组的所有培养瓶装入，放入指定的培养箱中。果蝇的麻醉及接种、培养瓶从培养箱中拿出，取其中三只培养基凝固的形态等都比较好的培养瓶用标签纸写上培养的果蝇品种，姓名及日期。贴相应的培养瓶上。、一个麻醉瓶，向支管处滴入1-2滴的乙醚，将原来从老师那里换来的有果蝇的培养瓶正着放在白纸板上敲击是果蝇全部落在瓶底，立刻打开培养瓶的塞子将麻醉瓶倒扣上去。然后倒过来，轻轻敲击培养瓶，使果蝇全部进入麻醉瓶的底部。迅速的塞上麻醉瓶和培养瓶的塞子。、让果蝇在麻醉瓶中待三分钟左右，直到果蝇晕厥过去（判断果蝇到底是死亡还是晕厥，如果果蝇的翅膀张角超过45度，则果蝇已经死亡）。、将果蝇倒在白纸板上如果麻醉瓶的底部有果蝇未倒出则用毛笔轻轻扫出。再将果蝇用毛笔轻轻扫入写着对应标签的新培养瓶中，将果蝇接种后先将培养瓶横放，等果蝇醒来后再竖放。不同品种同学之间相互调节。果蝇的雌雄分辨及性状观察、将解剖镜拿出，将装有果蝇的培养瓶放在解剖镜上观察果蝇的一些外部性状。通过不同的性状特征来分辨果蝇的雌雄。、去一只观察到的雄果蝇，将其制作成切片，放在显微镜上用40倍观察果蝇的性梳。实验结果 实验中通过果蝇体型的大小来判断果蝇的雌雄，其中雌果蝇较大（左侧），雄果蝇较小（右侧）：野生型果蝇的眼睛颜色为砖红色，饱满圆形：雄果蝇在前腿跗节