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新USP/EP/JP 藥典微生物檢驗方法 USP Microbial Limits Microbial Limit Tests” into two chapters: 61 Microbial Enumeration Tests: Total aerobic microbial count (TAMC)-嗜氧性總生菌數 Total combined yeasts and molds count (TYMC)- 總黴菌及總酵母菌數 62Tests for specified microorganisms New Harmonised Media: Changes Absence of Specified Microorganisms Salmonella-沙門氏桿菌 Pseudomonas aeruginosa -綠膿桿菌 Staphylococcus aureus-金黃色葡萄球菌 Escherichia coli -大腸桿菌 Clostridium spp. -梭狀產芽孢菌 (formerly Cl. perfringens) Bile-Tolerant Gram-Negative Bacteria-膽鹽忍受性革蘭氏陰性菌 (formerly Enterobacteriaceae) Candida albicans-白色念珠菌(NEW) Method of the examination Membrane filtration Plate-count method - pour-plate method - surface-spread method Most-probable-number method Membrane filtration Plate-count method – Pour plate 每 1 個稀釋倍數至少進行二重覆 TAMC : TSA 30~35℃培養 3~5天 TYMC : SDA 20~25℃培養 5~7天 Plate-count method - Surface spread 結 果 判 讀 對照組：應保持澄清（即應無菌生長），否則試驗無效 試驗組：可由下表查出檢體每g或每mL最可能含有好氧性微生物之總數 若在判讀上出現困難，則重新活化在相同的broth 或 TSA上，以30 ~ 35℃培養 1 ~ 2天 Growth promotion of the media Growth promotion of the media Growth promotion of the media Thank you !!! 特定病原菌的檢驗在非規定無菌的藥品中是不得檢出的，這些菌類統稱為控制菌(objectable microorganisms)。藥品中是不允許污染有致病微生物的，但是致病微生物種類繁多，不可能在藥品中逐一進行檢測，而是透過檢測某種致病微生物存在於某種藥品中的可能性，從而選作特定病原菌。 雖然藥品種類和用途不同，但是各國選定的特定病原菌的種類大多相同，但有些國家也稍有差異。中華藥典規定藥品特定病原菌包括大腸桿菌(Escherichia coli)、沙門氏菌(Salmonella spp.)、綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)，而英國及中國大陸藥典尚另外包括梭狀產芽孢桿菌(Clostridium spp.)。 在USP中所提到的藥品中所要求檢測特殊病原菌, 主要是指大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌以及綠膿桿菌另外在USP-30更新增了腸內菌, 梭狀產芽孢菌,及白色念珠菌的檢測及鑑定。 特殊病原菌的檢驗應根據其特性進行增菌, 在選擇性培養基生長能力及菌落特徵觀察, 革蘭氏染色鏡檢, 血清學鑑定等 建議同時需用ATCC標準菌種株作為對照試驗, 對照菌株為看是檢測何種項目, 就用何種菌株 生長促進試驗是接種≦100 cfu菌液, 而生長抑制試驗是接種≧100 cfu菌液 革蘭陰性短桿菌，屬於腸桿菌科埃希氏菌屬(Escherichia)。該菌是腸道正常菌群，當人體抵抗力下降或細菌侵入腸外組織或器官時，可引起腸外感染。一部分血清型的大腸桿菌可引起腸道感染，稱為致瀉性大腸桿菌。 致瀉性大腸桿菌根據其致病特點分為五種，即腸病原性大腸桿菌(EPEC)、腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、腸產毒性大腸桿菌(ETEC)、腸出血性大腸桿菌(EHEC) 和腸黏附性大腸桿菌(EAEC)。 致瀉性大腸桿菌透過帶菌動物和人類的糞便污染藥品，可引起腹瀉之食物中毒症狀，但症狀一般輕微，因菌型不同呈現不同程度的腸胃道症狀。 取10 g