大学课件 农田温室气体CH4产生的微生物生态学机理研究进展.pptVIP

未来展望 1.更多的产甲烷菌的分离鉴定； 2.分子生物学手段的运用； 3.农田原位研究产甲烷菌； 4.农田甲烷产生的分子和生态、生理机理 谢 谢！ 农田温室气体CH4产生的微生物生态学机理研究进展 吴洪生 南京信息工程大学 应用气象学院 1.温室气体甲烷概况 2.农田温室气体甲烷的来源 3.农田产甲烷微生物 4.环境条件与农田甲烷的产生 5.不产甲烷菌与产甲烷菌生态互作关系 甲烷是地球上主要的温室气体，对全球气候变暖的增温作用大约占15%，其相对二氧化碳的增温效应值为19。 1776年，A.伏打发现池沼沉积物中有一种可燃性气体，沼气。 1868年，E.贝香提出沼气是由微生物降解有机质而产生的。 太空望远镜上拍摄火星甲烷 --黄（红）色部分是甲烷 卫星上拍摄地球甲烷 --棕色部分是甲烷 农田温室气体甲烷的来源: 1.土壤腐殖质的分解 --5-8% 2.土壤有机残体分解 --40-70% 3.有机肥分解 --20-40% 4.其它人工合成有机物 --10-15% 与农田甲烷形成有关的微生物1.先导生态菌群2.产酸产氢微生物（菌群） 3.产甲烷细菌（菌群） 不产甲烷菌群 1.甲烷细菌（菌群） ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? 甲烷细菌是专性厌氧的，属于古细菌，对温度、pH值、微量氧、有毒物质等敏感。最适宜温度35°C-38°C，4 °C也能生存，甲烷细菌要求的pH值在6.8-7.2之间。 是一群非常特殊的微生物。只能利用比较简单的有机化合物和无机化合物，而且生长缓慢。为化能自养型，存在对氧极为敏感的F420因子，即使存在微量的氧都会对产甲烷菌造成不利影响。  所有产甲烷菌都能利用氢气和二氧化碳，代谢产生甲烷，其中绝大多数还能利用甲酸和乙酸。乙酸是产甲烷的关键性物质，大约72%的甲烷来自于乙酸。 产甲烷菌的生长繁殖相当缓慢。甲烷菌的繁殖倍增时间一般都比较长，达4～6天。在人工培养条件下需经过十几天甚至几十天才能长出菌落。 菌落一般圆形、透明、边缘整齐，在荧光显微镜下发出强的荧光。 在厌氧条件下以甲烷为特异代谢产物。1956年，H.A.巴克打破按形态差异将产甲烷细菌分散在不同科属中的分类系统，把具有上述特性的多种形态的细菌划归为一个生理群，建立甲烷细菌科。《伯杰氏鉴定细菌学手册》(第 8版)基本上采纳了巴克的系统。70年代后期和80年代初，G.E.福克斯、W.E.巴尔赫和C.R.沃斯等人发表比较产甲烷细菌和其他细菌以及某些真核 生物的16S（或18S）核糖体核糖核酸(rRNA)寡聚核苷酸序列谱的相似性的研究成果，指出产甲烷菌是一群独特的产物，与其他细菌和真核生物显然不同。他们主张把产甲烷细菌归属于古细菌，与其他细菌（真细菌）和真核生物并列为生物的3大类群。 　　W.E.巴尔赫还提出了产甲烷细菌的分类系统，其中包括甲烷杆菌目、甲烷球菌目和甲烷微菌目 3目，甲烷杆菌科、甲烷球菌科、甲烷微菌科和甲烷片菌科4科。 　产甲烷细菌的特性为：①代谢产物为甲烷和二氧化碳；②产能机质范围窄，为氢、甲酸、甲醇、乙酸、甲胺类；③需要低的氧化还原电位（-330毫伏）；④有独特的辅酶，辅酶及生长因子为辅酶M.F420、F430、COM、F342,B因子.CDR、 F430等； ⑤有独特16SrRNA寡聚核苷酸序列谱；⑥ tRNA中缺乏其他生物所共有GTψCG核苷酸序列；⑦细胞壁中没有其他细菌细胞壁中所共有的胞壁酸和 D型氨基酸；⑧所含类酯大部分不可皂化为含植烷醚键、鲨烯、氢沙烯；⑨ DNA的分子量可能为大肠杆菌的1/3(1.1×109)。 目前总共分离、鉴定出237株产甲烷菌。　　 农田土壤产甲烷细菌群落分子生态分析 Lysis, DNA/RNA extraction DNA/RNA purification PCR/RT-PCR amplification of 16S rRNA or functional genes DGGE, TGGE, RFLP, t-RFLP, SSCP Cloning Sequencing Identification Phylogenetic analysis Fingerprinting: 土壤产甲烷细菌群落系统进化树 产酸产氢微生物（菌群） 醋酸杆菌、丁酸梭菌、乳酸菌、乳酸杆菌、拟杆菌属、气杆菌属、发酵单胞菌属、梭状芽孢杆