放射性核素示踪技术的应用-研究生.pptVIP

以核素示踪技术为基础，融合其他学科的先进成就（如分子生物学、免疫学、电子学、计算机等），形成: 核素动力学分析（+动力学分析） 体外放射分析（+结合反应） 放射自显影（+摄影技术） 分子核医学（+分子生物学） 核素显像（+显像技术+计算机技术） 核素治疗学（+药物动力学） 14C呼气试验检测幽门螺旋杆菌感染 原理：利用幽门螺旋杆菌（HP）可以分解尿素(NH2CO)为氨和二氧化碳的原理，将稳定性核素14C的标记尿素给病人口服，一段时间以后，检测14CO2的含量而确定有无幽门螺旋杆菌感染。 特点：灵敏性和特异性都很高 第二节 放射性核素稀释法 放射性核素稀释法 是利用化学物质在稀释前后质量不变的原理与示踪动技术相结合而建立的微量物质定量分析方法。 一、放射性核素稀释法的原理 原理：放射性核素在稀释前后的总放射性活度不变。 利用已知比活度S（放射性浓度C）和质量的示踪剂加入到未知质量的非标记同质体系中，示踪剂被稀释，比活度或放射性浓度下降，但总放射性不变。 注意事项 示踪剂有足够高的比活度或放射性浓度； 充分混匀； 精细操作（称量、取样、测量）。 用已知标记物测未知非标记物 S1m1=S2m2 m2=C1m1/C2或 C1m1=C2m2 m2=C1m1/C2 例 用放射性浓度为3×106cpm/ml的125I-HAS 1ml注入一成人体内，平衡后取静脉血1ml，测其放射性浓度为500cpm/ml，问该人的血容量是多少？ 解： C1= 3×106cpm/ml V1=1ml C2=500cpm/ml 求V2？ C2（V1+V2）=C1V1 因C2C1，则：C2V2=C1V1 3×106×1=500×V2 V2=3×106/500=6000ml 三、应用放射性核素稀释法的必要条件 正确选用标记物和非标记物 稳定性好、比活度高、无毒、不发生非代谢性交换反应、与待测物化学性质和生物学性质相同 准确稀释和充分混匀 分离纯化和测定样品的方法要可靠 核素稀释法的优点 最大优点：不需待测物质定量回收。 尤其是以下情况 （1）未知物质无法定量分离； （2）需要快速分析； （3）需分离的物质浓度很低； （4）测量整体分布容积。 四、放射性核稀释法的应用 测定生理性物质的体内代谢库 检测整体内某些体液成分的量 放射性核素稀释法的发展 核素双稀释法、稳定性核素稀释法 第三节 物质转化的示踪研究 目的：揭示机体内各种代谢物质的前身物、中间物及最终产物的关系及其转化条件，是正确认识生命现象的物质基础。 示踪剂可以与被示踪物一样参与机体内的运行、分布并参与机体的各种转化、代谢过程。 运用各种标记物前体，来判断前体与产物之间的关系，如转化速度、转化部位、转化所需条件、转化过程、转化影响因素等。 一、参入实验基本原理 二、主要参数 1）参入百分率（相对参入量） 掺入百分率=产物放射性/前身物放射性×100% 2）相对比活度 相对比活度=产物的比活度/前身物的比活度×100% 三、参入实验的类型 （一）整体参入实验 多采用动物实验：DNA合成的有效前身物（3H-TdR） （二）离体参入实验 淋巴细胞转化实验 四、基本方法和要求 （一）基本方法 1、选择合适的标记物 2、将标记物引入生物体系 3、分离产物 4、测量产物 （二）基本要求 1、标记前身物用量是示踪量：比活度足够高 2、放化纯度尽可能高（98%） 3、分离的产物要求达到放化纯 参入实验（incorporation experiment） 3H-TdR 参入实验 第四节 物质吸收、分布及排泄的示踪研究 将放射性核素标记的物质引入机体内，不同时间测定体液及脏器中的放射性分布，以了解物质在体内的吸收、分布及排泄情况。 一、吸收试验 153Sm-EDTMP注入动物体内，注后10min，分别测心、肺、肝、肾、骨等放射性，骨摄取率最高。 二、分布实验 SPECT或PET显像 静态与动态显像 局部与全身显像 平面与断层显像 特点：符合生理条件，可进行功能与形态两方面检查。