五磨饮合四逆散配方颗粒及传统合煎剂定性定量比较.docVIP

五磨饮合四逆散配方颗粒及传统合煎剂定性定量比较 　 ; 作者：邹萍，田祥琴，郭明娟，黄静，韩英光 【摘要】; 目的 对五磨饮合四逆散配方颗粒和传统合煎剂进行定性定量比较。方法 采用薄层层析（ＴＬＣ）进行定性比较和高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）测定芍药苷的含量。结果 ＴＬＣ结果显示，配方颗粒与合煎剂的化学成分种类相似，但合煎剂的斑点比配方颗粒的斑点更明显；ＨＰＬＣ研究表明，芍药苷在０．０３５ ５～０．４２６ ｍｇ范围内线性关系良好（ｒ＝０．９９９ ９），平均加样回收率为１００．４９％，ＲＳＤ＝１．０７％（ｎ＝５），配方颗粒中芍药苷含量约为合煎剂的９５％。结论 传统合煎剂与配方颗粒两者的化学成分基本相同，但芍药苷含量略有差异。 【关键词】; 五磨饮合四逆散；配方颗粒；芍药苷；ＨＰＬＣ；薄层层析；定性；定量 ; 五磨饮合四逆散是五磨饮子和四逆散两个方剂的合方。五磨饮子首见于清·汪昂《医方集解》，由沉香、木香、槟榔、枳实、乌药５味中药组成，功效为破滞降逆，“治暴怒气厥卒死”［１］。四逆散出自《伤寒论》，由柴胡、白芍、枳实、甘草组成，用于治疗气郁证，四肢厥逆［２］。五磨饮合四逆散是在这两个方剂的基础上加减，由沉香、乌药、木香、枳壳、柴胡、白芍、甘草、薤白、黄连以及肉桂１０味中药组成的合方，具有行气理气、和表解里、疏肝理脾等功效［３］。 ; 中药配方颗粒是运用现代化科学技术将传统中药饮片分别提取、浓缩、干燥成的颗粒剂，使用时按处方剂量取各味配方颗粒，直接加热水溶解后饮用，具有不需煎煮、方便、快捷、安全、卫生等特点，更能适应现代社会快节奏的生活方式和临床应用的需要［４］。由于配方颗粒与传统煎剂的水煎方式不同（前者为分煎，而后者为合煎），可能存在提取成分的差异。为了比较两者之间的异同，本实验对五磨饮合四逆散的配方颗粒与合煎剂进行了薄层层析（ＴＬＣ）定性比较和芍药苷高效液相色谱（ＨＰＬＣ）定量比较。现将实验方法与结果报道如下。 ; １ 实验材料 ; １．１; 仪器 ; ＬＣ－６Ａ高效液相色谱仪（日本岛津公司）；ＢＳ２２４Ｓ电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；ＡＳ３１２０Ａ超声波清洗器；ＬＸＪ－８４－０１离心机（北京医疗仪器修理厂）。 ; １．２; 试药 ; 芍药苷对照品购自中国药品生物制品检定所，批号：１１０７３６，规格：９５％；中药饮片与配方颗粒由深圳三九现代中药有限公司提供，根据生产记录，中药饮片为同批次配方颗粒生产原材料；乙腈为色谱纯，其他试剂为分析纯。 ; ２ 方法与结果 ; ２．１; 薄层层析定性比较 ; ２．１．１; 供试品溶液的制备; 按日处方量称取药材，加１０倍量水浸泡３０ ｍｉｎ，煎煮２０ ｍｉｎ，滤过；药渣再加入１０倍量水，煎煮２０ ｍｉｎ，滤过；合并两次滤液，减压浓缩至４００ ｍＬ，即得合煎剂母液。量取母液５０ ｍＬ，用石油醚（３０～６０ ℃）萃取２次，每次２５ ｍＬ，分取、合并石油醚层，减压浓缩至干。残留物用２ ｍＬ甲醇溶解即得供试液Ａ１。石油醚萃取后的水层，挥去残留的石油醚后，再用水饱和的正丁醇萃取２次，每次２５ ｍＬ，分取、合并正丁醇层，减压浓缩至干，残留物用２ ｍＬ甲醇溶解作为供试液Ｂ１。 ; 按日处方量取相应配方颗粒，加入４００ ｍＬ沸水溶解，作为配方颗粒母液。量取该母液５０ ｍＬ，以下按合煎剂供试液制备方法同样操作，分别制成配方颗粒供试液Ａ２，Ｂ２。 ; ２．１．２; ＴＬＣ比较分析; 分别取供试液Ａ１和Ａ２各１００ ｍＬ，点样于同一硅胶薄层板上，以环己烷－乙酸乙酯（７∶３）为展开剂，展开约１５ ｃｍ后，取出，晾干，在紫外灯（２６５ ｎｍ）观察斑点的数量及荧光的强弱；然后喷１０％硫酸乙醇液，加热至显色，日光下观察斑点的数量及色泽的深浅。 ; 另分别取供试液Ｂ１和Ｂ２各４０ ｍＬ，点样于同一硅胶薄层板上，以氯仿－甲醇－水（６５∶３５∶１０）下层为展开剂，展开约１５ ｃｍ后，取出晾干，喷１０％硫酸乙醇液，加热至显色。日光下观察斑点的数量及色泽的深浅。 　 ; ２．１．３; 结果; 供试液Ａ１和Ａ２的ＴＬＣ在紫外灯（２６５ ｎｍ）下显示，两者的荧光斑点数量基本一致，但供试液Ａ１的斑点比供试液Ａ２的斑点更明显；喷１０％硫酸乙醇液加热显色后，也显示了相同的结果；供试液Ｂ１和Ｂ２的ＴＬＣ硫酸显色后，两者的斑点数量基本一致，但供试液Ｂ１的斑点比供试液Ｂ２的斑点更明显。 ; ２．２; 芍药苷含量测定 ; ２．２．１; 色谱条件; 色谱柱：Ｉｎｔｅｒｓｉｌ－ＯＤＳ色谱柱（４．６ ｍｍ×１５０ ｍｍ，５ ｍｍ）；流动相：乙腈－水（１５∶８５）；检测波长：２３０ ｎｍ；流速：１ ｍＬ／ｍｉｎ；柱温：室温。 ; ２．２．２; 供试品溶液的制备; 精密量取“２．１”项下合煎剂母液２５ ｍＬ，减压