穴位埋线对更年期雌性大鼠下丘脑单胺类神经递质影响.docVIP

穴位埋线对更年期雌性大鼠下丘脑单胺类神经递质影响 　 作者：李月梅　李艳慧　詹珠莲　李向阳廖冰洁　冯淑兰 【摘要】 【目的】通过观察穴位埋线对更年期大鼠下丘脑去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5羟色胺(5HT)、5羟吲哚乙酸(5HIAA)等单胺类神经递质的影响，探讨其对更年期综合征防治作用的机理。【方法】 选用60只SD 雌性大鼠 ，随机分为治疗组、模型组和假手术组各20只;除假手术组外，其他组均采用手术摘除大鼠双侧卵巢复制去势更年期大鼠模型，治疗组选取肾俞、三阴交、子宫穴进行穴位埋线，1次/周，连续4周;采用放射免疫法检测下丘脑组织NE、DA 、5 HT、5HIAA含量。【结果】模型组较假手术组的NE、DA水平显著降低(Plt;005或Plt;001)，5HT、5HIAA水平显著上升(Plt;001或Plt;0001)，5HT/NE比值显著升高(Plt;0001);穴位埋线组与模型组比较，可显著升高衰退的NE水平(Plt;005)，降低5HT、5HIAA水平(Plt;005或 Plt;001)，且埋线组的5HT/NE比值亦较模型组显著降低(Plt;001)。【结论】穴位埋线治疗更年期综合征的作用可能与其能调整去势雌性大鼠下丘脑单胺类神经递质，纠正下丘脑紊乱的植物神经功能有关。 【关键词】 更年期/针灸疗法;　神经递质;　疾病模型，动物;　大鼠;　穴，肾俞;　穴，三阴交;　穴，子宫 更年期综合征又称围绝经期综合征，是由于卵巢功能逐渐减退，血中雌激素水平波动或下降，从而引起植物神经功能失调为主，伴有神经心理症状的一组症候群。近年来研究发现本病有发病年龄提前、发病率上升的趋势，且其发病与中枢神经递质的紊乱密切相关[1] 。本实验通过观察穴位埋线对去势更年期模型大鼠下丘脑中单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5羟色胺(5HT)、5羟吲哚乙酸(5HIAA)含量的影响，探讨其对更年期综合征防治作用的机理。现报道如下。　　 　　1　材料与方法 　　11　 实验动物及造模[2]　 选用60只3～4 月龄健康清洁级SD 雌性未孕大鼠， 体质量(200 ±20)g，由广州中医药大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK(粤)20060015，饲养环境合格证号：0009161，实验前将动物置于室内适应环境1周，室温18℃~22℃，湿度40%~60%。将实验动物随机分为治疗组、模型组和假手术组各20只，其中治疗组和模型组在200mg/L乌拉坦腹腔麻醉下，腹位固定，行双侧卵巢摘除术，术后5d阴道涂片，连续5d，观察造模是否成功;假手术组仅行麻醉和腹位固定，不予卵巢摘除。 　　12　主要试剂与仪器　NE、DA 、5HT 、5HIAA标准物由Sigma 公司提供; 正丁醇由广州威佳公司提供;RF540 型荧光分光光度计(日本);高速冷冻离心机(美国);SN695型γ计数器(上海核福光电仪器有限公司)。 　　13　治疗方法　造模成功后，治疗组用支架固定，根据华兴邦等[3]制定的大鼠穴位图谱选取肾俞、子宫、三阴交穴进行穴位埋线治疗，其中子宫、三阴交穴取仰卧位，肾俞选俯卧位，选好穴位后以医用安尔碘严格消毒，医者用一次性注射器7号针头作针管，以华佗牌不锈钢针灸针(03mm×30mm，剪去针尖)作针芯，穿好05cm长0型肠线后将注射针头迅速刺入穴位，到达肌层后将针芯轻轻推入，边推针芯边退针管，出针后用棉签轻压片刻即可。1次/周，连续埋4周为1个疗程。模型组和假手术组不埋线，仅用注射针头刺激穴位。 　　14　样品制备及检测方法　末次埋线治疗12h后，在乌拉坦麻醉下迅速断头处死后立即剖取下丘脑，在冰皿上精确称取下丘脑第三脑室周围组织，于冰玻璃板上分离出下丘脑， 称质量后分别加10 倍体积的冷酸性正丁醇， 用玻璃匀浆器在冰水中匀浆。若脑组织质量低于300mg， 则用3mL酸性正丁醇匀浆，质量不足部分用双蒸水补充， 其量为不足脑组织质量的80% ， 匀浆液离心5min (2 000r/min ) ， 取上清液25mL 备用。参照文献[2]法测定下丘脑中NE、DA、5HT、5HIAA 含量，同时计算5HT/NE比值。　 　　15　统计学方法　采用SPSS 100软件进行数据处理。 　　　2　结果 　　表1结果显示，模型组较假手术组的DA、NE水平显著降低(Plt;005或Plt;001)，5HT、5HIAA水平则显著上升(Plt;001或Plt;0001)，5HT/NE比值显著升高(Plt;0001);而埋线组与模型组比较可显著升高NE水平(Plt