氧化应激对胰岛β细胞功能影响.pdf

前 言 氧化应激是指机体在遭受各种有害刺激时，自由基的产生和抗氧化防御之间 的动态平衡被破坏，导致机体组织损伤。自由基的种类很多，与氧化应激密切相 关的主要为活性氧(reactive oxygen species，ROS)。ROS是氧元素在机体内进行氧 化还原反应中的产物，具有未配对电子的分子、离子、原子或原子团，这些含氧 dioxide，H2仉)是其 的活性物质都具有较氧活泼的化学性质，过氧化氢(hydrogen 中重要的一种R0s，其他还包括超氧阴离子自由基、羟基自由基、单线态氧等。 过多的ROS会破坏组织蛋白、脂肪、核酸，反应同时产生过氧化脂质。 糖尿病是一种由于胰岛素分泌缺陷和(或)胰岛素抵抗引起的，以慢性高血 糖为特征的代谢紊乱疾病。其中胰岛B细胞的功能损害是糖尿病的一个主要的发 病环节，近年来许多研究发现糖尿病可以导致氧化应激的发生，无论是在实验诱 导的糖尿病大鼠体内，还是糖尿病患者体内均存在着氧化应激现象(1讲。 Nishikawa T-等(5)发现高糖可以独立的引起2型糖尿病患者血浆和尿的8羟基脱氧 鸟苷酸的升高，而后者是氧化应激的一个重要标志物(6)。 Brownlee提出的统一机制学说(7’认为。高糖环境下，线粒体呼吸链中过多生 成的氧自由基可激活多元醇途径、晚期糖基化终末产物途径、蛋白激酶C途径， 后者反过来也能够促进自由基的生成，从而形成恶性循环，是导致糖尿病各种并 发症发生、发展的中心环节。因此认为氧化应激在糖尿病并发症中起重要作用， 而现在一些研究发现其在胰岛8细胞功能的损害中同样有着不可忽视的作用 (8-9)。在糖尿病情况下，胰岛B细胞中ROS的生成也与其他组织一样，主要来源于 线粒体的电子传递‘10)、蛋白质的非酶糖化‘11)、氨基已糖途径的激活‘12’等途径。 胰岛p细胞分泌的胰岛淀粉样多肽也可引起胰岛p细胞发生氧化应激反应，其与细 胞表面相应的受体结合，破坏细胞完整性，产生ROS(1孙。而且胰岛6细胞内表达 的抗氧化物酶如超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶(hydrogen peroxidase，CAT)，相对于其他组织都要来得低，这也使胰岛B细胞更容易受到 氧化应激的攻击(1”。 duodenumhomeobox 胰腺十二指肠同源异型盒(pancreas factor-1，PDX．1)是 ～种在胰岛B细胞特异表达的，在胰岛B细胞的发生、分化、成熟及再生等过 程中起重要作用，是调节胰腺发育、胰岛细胞功能和胰岛素基因表达的重要因子 4 05-20)。PDX一1是胰岛素基因最重要的转录激活因子，同时也是葡萄糖激酶 (glucokinase，GK)、葡萄糖转运蛋白-2(glucose 岛素释放有关的一组基因的转录调控因子Ⅲ-24)。在成体胰岛p细胞，短期高血糖 环境可促进PDX一1与胰岛素基因的结合，提高胰岛素mRNA的水平；但在长期高 现，持续高糖刺激胰岛13细胞后，可减少PDX一1的表达，高糖还能降低PDx一1 和鼠胰岛素启动子元件3b结合蛋白的DNA结合活性，抑制胰岛素基因启动子的 活性，使胰岛素raRNA的生成减少，从而导致胰岛素的合成和释放降低。而一些 动物试验发现抗氧化剂能提高胰岛B细胞内PDX-1的水平、并增加胰岛素mRNA 的表达及胰岛素浓度。这提示氧化应激可能在糖尿病的发生、发展中起着重要作 用，是很值得研究和探讨的。 本研究在体外培养大鼠胰岛B细胞，用葡萄糖／葡萄糖氧化酶 oxidase，G／GO)体系产生不同浓度的H202，模拟体内氧化应激 (glucose／glucose 水平，作用于培养的B细胞，探讨氧化应激对胰岛B细胞的胰岛素、c肽分泌功 能的影响，并用CAT清除H。02，降低氧化应激水平，初步探讨其胰岛B细胞损 害的机理。 氧化应激对胰岛细胞分泌功能的影响及其部分相关机制的研究 引 言 糖尿病的代谢紊乱可引起氧化应激水平的升高，氧化应激主要由R