川芎嗪对早期胚胎发育和植入过程中IL-6表达影响.pdfVIP

第一部分文献综述及本题意义 一、早期胚胎发育与着床 小鼠受精卵和早期胚胎在体外培养时，其发育常停滞于2一细胞期，此现象称为体外 2一细胞阻滞(2一cell block)。2一细胞阻滞的确切发生机制尚不明确。目前国内外克服 小鼠2一细胞阻滞多采用：(1)选杂种一代(F1代)雌鼠；(2)与输卵管上皮细胞共培养； (3)配制特异性专用培养液等“1．前两方法在实际应用中常受制于实验条件或要求而难 以普遍使用，现在人们开始把注意力集中在专用培养液上． 前人研究发现，早期胚胎以丙酮酸盐为主要能量物质，直到囊胚期，才以葡萄糖为 主要的能量物质嘲。葡萄糖对胚胎8～16细胞期及以后阶段的发育具有十分重要的作 用，而对2-细胞胚胎的发育却有阻滞作用跚，桑椹胚在含葡萄糖的培养液中，可利用葡 萄糖；而桑椹胚在不含葡萄糖的培养液中，对丙酮酸盐的利用显著增加。可以推断早期 胚胎在不同的培养条件下，对能量的利用是随着培养条件的改变而改变的。而Devgan 最近比较发现，若从培养开始起就加入葡萄糖，则M16的培养效果要优于CzB伽，葡萄 糖不仅不会导致2一细胞阻滞，而且从培养的一开始就应该加入，因为观察到从第3d加 入葡萄糖的囊胚形成率低于开始就加糖的形成率。产生这一差异的主要原因可能与种 属的特异性有关，昆明种小鼠可能与Chatot等所研究的鼠在遗传特性、与环境因子相 细胞阻滞”嘲，胚胎发育所需的能量来源在致密化前为三羧酸循环，致密化后为糖酵 解”1。向8一细胞的仓鼠胚胎培养液中单独加入合适浓度的琥珀酸盐或苹果酸盐都能够 提高胚泡的发育率，且两种物质联用时效果更佳，但若向其中加入葡萄糖或磷酸盐， 则会降低胚泡的发育率跚。 输卵管液中含有多种氨基酸，可满足孕卵不断发育的需要。如甘氨酸和丙氨酸为输 卵管液多种氨基酸中的浓度最高，有利于早期胚胎的发育。同样，最利于囊胚发育和分 化的条件却会降低早期胚胎的发育及存活能力，如丙酮酸是卵裂阶段胚胎利用的主要 营养素，胚胎逐渐发育至囊胚期，丙酮酸的需要下降，而葡萄糖的利用逐渐增加。不同发 育时期的胚胎对氨基酸的需要也不相同。有一些氨基酸对卵裂期胚胎的发育有良好的 促进作用，这些氨基酸包括：丙氨酸、谷氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺等嗍，它们可以缩短 胚胎卵裂的时间。谷氨酰胺酶将谷氨酸盐转化为谷氨酸，在2一细胞阶段就能检测到谷 氨酰胺酶mRNA的表达，其mRNA量从2一细胞开始逐渐升高直至囊胚期“…。而囊胚发育 所需要的一些氨基酸，对早期卵裂期胚胎发育却无有利作用。 白小鼠的体外受精和受精卵突破2一细胞阻滞发育至囊胚期。Gardner等人的试验表明， 发育的后期，则通过抑制糖酵解而阻滞胚泡的发育和内细胞团的发展““。同时，叻TA 作为一种金属离子鳌合剂，可帮助清除受精卵发育中产生的对发育有影响的其它离子 “”。牛磺酸可能具有三方面的作用，其一为通过减弱有毒物质或通过调节渗透压保护 细胞膜；其二是抗诱变的效应；其三是可以和胰岛素受体结合起胰岛素样作用““…。 孵出后的囊胚定位并粘附于子宫内膜腔上皮细胞，通过胚源性促性腺激素、血小 板活化因子、雌激素诱导子宫内膜着床窗局部蜕膜化，表现为基质水肿，细胞增大， 糖蛋白分泌增加，细胞凋亡增加等，有利于滋养层细胞侵入；生长因子和细胞因子及 其受体共同作用调节和控制滋养层细胞增生与侵入程度。一方面滋养层细胞和子宫蜕 膜细胞产生大量粘附分子(如整和素、钙调蛋白)形成特定的细胞基质并外延生长， 促进滋养层细胞与蜕膜细胞相互融合形成胎盘组织；另一方面已经分化的细胞滋养层 细胞在硫酸磷脂作用下融合成多核的合体滋养层细胞产生分泌功能，起到营养胚胎的 作用。 胚泡着床又称为植入(iⅡlpl删州on)，包括胚泡在子宫内膜中的定位、黏附、入侵 等过程，是哺乳动物及人类生殖过程的重要环节，是母体与胚胎同步发育、相互作用 的结果，胚胎植入是妊娠能否成功的关键。母体子宫内膜必须发生一系列复杂而精细 的变化，达到“可容受”状态时，胚泡才能成功地黏附和植入。其过程主要受三个层 次的调节：激素、细胞因子和酶。人类受精卵在受精后的第3～4天进入子宫腔，并在 宫腔内游离2～3天，胚泡从透明带中脱出，露出表面的滋养外胚层，滋养外胚层开始 向外扩展，并对细胞外基质产生粘附性。围绕胚泡腔的壁滋养外胚层分化成初生滋养 层，侵入子宫基质和血管基底膜；与内细胞团相连的滋养外胚层增殖成次生滋养层， 宫内膜基底层和内l／3肌层。完成胚胎植入过程。 2