第二节 3 DNA复制.ppt

A replication eye forms a theta structure in circular DNA. 3.6. 真核生物DNA的复制 (DNA replication in Eukaryote) 1、 复制概况 a、多个复制元（multiple replicon ），双向复制 b、复制元相对较小(13-900kb), 复制速度较慢,大 约 500~5000bp/min （3000bp/min） 冈崎片段100～200NT c、复制终止通过复制 叉的相遇而终止 multiple replicon 例；果蝇 5000 replicons 平均 40Kb（酵母） 哺乳动物 平均100Kb 2、 真核生物的DNA聚合酶 α、β、δ、ε、γ五种 位置 核内 核内 核内 核内 线粒体 合成 与引发 修复 合成 合成,修复 复制 功能 酶结合 前导链 后随链 3’－5’校 NO NO Yes Yes Yes 正活性 α β δ ε γ 真核生物DNA复制的引发酶 ● DNApolα + primase形成紧密的复合物 6-9 Nt RNA as primer ● 引发酶（primase）： 50-60kd ● 作用方式为阵发性的，每次作用拷贝6～15个核苷酸 ● 既能利用rNTP，又能利用dNTP ● SV40体外DNA复制情况分析 ε δ 3、 真核生物的复制起始受许可因子的控制 4、 逆转录酶 自学 5、 真核生物染色体 DNA末端补齐模式 (1) 端粒DNA (Telomer) TTGGGG(T2G4)序列高度重复的末端 5’ TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGG 3’ (富含 G 链) 3’ AACCCC AACCCC AACCCC 5’ (富含 C 链) （2） 端粒酶（ Telomerase） 1985. Carol Greider Blackburn, 1986. Gottchling 四膜虫 端粒酶 （ telomerase ）将T2G4 末端重复延伸 Telomerase = RNA CAAAACCCC 链 + 末端结合蛋白 （TBP） 端粒酶－－－逆转录酶 a、核蛋白（ ribonucleoprotein RNP） b、含约长150NT的RNA，其中含 1～5 拷贝的CxAy重复序列， 是合成端粒T2G4的模板 c、延长的3’-T2G4端（一段cDNA）作为5’-端DNA合成的模板 第五节 原核生物DNA复制 (DNA replication in Prokaryote) 一、DNA复制机构的研究 利用突变表型来考察基因的功能 但只能利用条件型突变 温度敏感突变体 材料: E.coli 或噬菌体 二、DNA复制的起始 起始方式： a、从头起始（denovo initiation）: θ复制、D环复制、线状DNA的复制 b、共价延伸（covalent extesion） 滚环复制 （1） OriC in E. coli chromosomal DNA 1、 oriC与 E.coli 复制的起始（从头起始） ? 四个9bp的重复序列 dnaA结合位点 ? 三个13bp的重复序列 若干GATC位点 （2） 简单起始过程 a、涉及主要酶系： DnaA、RNApol是必不可少的，此外涉及到