分子标记技术及其在大麦遗传育种中的应用 - 中国知网.PDFVIP

doi:10.14069/ki.32-1769/s.2016. 02.001 网络出版时间：2016-05-05 网络出版地址：/kcms/detail/32.1769.S1137.001.html 分子标记技术及其在大麦遗传育种中的应用 #1 #2 1 1 余 其 ，王振波 ，沈真辉 ，李应秋 （1. 云南农业大学农学与生物技术学院，云南 昆明 650201 ；2.福建农科院作物研究所，福建 福州 350000 ） 摘要：大麦是世界上栽培最古老的粮食作物之一，也是十分重要的饲料和酿酒原料。分子标记技术不受环境和季节限 制，具有多态性高、信息量大、稳定性好等优势，已被广泛应用于大麦遗传育种。本文综述了分子标记主要类型、基 本原理及优缺点，并介绍了近年来分子标记技术在大麦分子遗传图谱的构建、遗传多样性研究、种质资源鉴定、目标 基因定位、起源与进化关系、分子标记辅助选择研究等方面的应用。 关键词：大麦；分子标记；遗传育种 中图分类号：S512.3；Q754 文献标识码：A 文章编号：1673-6486 大麦是世界上居于小麦、水稻、玉米之后的第 4 位重要的谷类作物，也是十分重要的饲料和酿 酒原料[1] 。大麦含纤维素、抗氧化成分、富含胆固醇生物合成抑制剂等，营养十分丰富，并且低糖 低脂肪，在医疗保健食品开发等方面也日益受到世界各国的重视。利用高产、优质、抗病的种质资 源，创造大麦理想株型突破产量屏障，开展大麦超高产优质育种已成为近年来大麦育种家备受关注 的热点。以前常规的育种方法已不能满足育种家的需要，近年来，分子标记通过提供准确、可靠、 稳定的 DNA 水平的遗传标记，已在大麦遗传图谱的构建、遗传多样性研究、目标基因定位及起源 关系进化研究等方面得到了广泛应用。 1 分子标记特点及主要的分子标记 分子标记可直接反映生物体基因组 DNA 间的差异。分子标记很少受表现型影响，相对于形态 学标记有如下特点：①不受环境及季节限制，不受试验材料部位的影响，而形态标记通常表达于特 定的环境和一定的组织；②具有较高的遗传多态性，信息量大；③大多数标记为中性标记，群体的 表型不会对其发生较大的改变；④显隐性互作情况不存在；⑤不受环境影响，同时也不存在上位效 应[2] ；⑥数量极多，遍及整个基因组；⑦大多分子标记能表现出共显性，可鉴定纯合基因型和杂合 基因型，提供完整的遗传信息；⑧同一套基因可以用于不同的物种[3] ；⑨引物可随机设定，便于在 物种中检出大量的 DNA 多态性；⑩操作简单快速。目前分子标记大致分为 3 大类型：①基于杂交 的分子标记；②基于PCR 的分子标记；③基于DNA 序列和芯片的分子标记。 1.1 以分子杂交技术为基础的分子标记 限制性片段长度多态性（Restriction Fragment Length Polymorphism，简称RFLP ）是利用特定的 _____________________ 收稿日期：2016-04-07 基金项目：国家自然科学基金项目 。 作者简介：#共同第一作者。余其 (1988—) ，女，硕士研究生，主要从事麦类植物分子遗传与育种研究。E-mail163.com 。 王振波（1989—），男，硕士研究生，主要从事植物资源的研究与利用。E-mail:754977774@ 。 限制性内切酶酶解基因组总的DNA ，用特异性探针进行 Southern 杂交，通过放射自显影检测 DNA 多态性，该标记为共显性标记。RFLP 的优点：①RFLP 标记可靠性高；②具有共显性，可区分纯合 和杂合；③无表型效应，不受发育阶段及器官特异性限制；④遍布于整个基因组，在数量上几乎不 受限制。RFLP 应用很多，但也有一些缺点：①具有种属特异性，在实际应用中受到限制；②需要 仪器设备较多，技术也较为复杂；③DNA 需求量大（5~10µg ），纯度要求高；④多态性水平低。因 此，RFLP 应用受到一定限制。 1.2 以PCR 技术为基础的分子标记 随机扩增多态性 DNA 标记（Random Amplified Polymorphic DNA ，简称RAPD