全内反射荧光显微镜（TIRFM）-中国显微图像网.pptVIP

全内反射荧光显微镜 医学实验05级 张园 郑雪飞 宋一萌 解依荻 全内反射显微镜的分型及其结构 全内反射荧光显微镜根据其成像系统的不同可分为棱镜型和物镜型两种类型 （一）棱镜型全内反射荧光显微镜 利用激光经过棱镜并产生全内反射，其消逝波照射已被荧光标记的生物样品，其激发光从另一侧进入物镜并被CCD相机捕捉。 棱镜型全内反射荧光显微镜光路示意图 评价 （二）物镜型全内反射显微镜 收集样品荧光信号的接收器 显微镜的物镜 发生全内反射的光学器件。 由于细胞的典型折射率为1. 33～1. 38 ,因此要想实现全内反射,物镜的NA 必须大于1. 38 。表达式为： NA = nsin（u/2） nsin（u/2） nsinθc NA 为物镜的数值孔径, n ,u分别为物镜的折射率(浸没油) 和孔径角。θc 为发生全反射的临界角。 二者比较 05级医学实验 宋一萌全内反射荧光显微技术利用全内反射产生的消逝波激发样品，由于消逝波强度成指数衰减，使激发区域限定在样品表面的一薄层范围内，因此具有其它光学成像技术无法比拟的高信噪比。 当今世界上研究单分子科学最具前途的新型生物光学显微技术之一 可用来实现对单个荧光分子的直接探测。 全内反射荧