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1 蛋白质化学(参考的答案)

《生物化学》(B )练习题参考答案 (氨基酸及蛋白质) 1、(1)先计算各氨基酸的等电点:Gly pI=6.07; Asp pI=2.95; Lys pI=9.80; Lys pI=7.69 (2 )根据pH 与 pI 关系判断各氨基酸在不同 pH 下的带电性质,如下: 氨基酸 pH 1.0 pH 2.1 pH 4.0 pH 10.0 甘氨酸(Gly ) + + + - 天冬氨酸(Asp ) + + - - 赖氨酸(Lys ) + + + - 组氨酸(His ) + + + - 2 、 (1) R 基为非极性的氨基酸:甘氨酸 Gly、丙氨酸 Ala 、缬氨酸 Val 、亮氨酸 Leu 、异亮 氨酸 Ile 、甲硫氨酸Met 、脯氨酸Pro 、苯丙氨酸Phe 、色氨酸 Trp ; (2 ) R 基为不带电荷极性的氨基酸:丝氨酸 Ser、苏氨酸 Thr、半胱氨酸 Cys、天冬酰胺 Asn 、谷氨酰胺 Gln、酪氨酸 Tyr ; (3 ) R 基为带正电荷极性的氨基酸:精氨酸 Arg 、赖氨酸Lys 、组氨酸His ; (4 ) R 基为带负电荷极性的氨基酸:谷氨酸 Glu、天冬氨酸Asp ; 3、脯氨酸(Pro )为亚氨基酸;除甘氨酸(Gly )外都有旋光性;缬氨酸、亮氨酸、异亮氨 酸的 R 基团非极性较强,互相排斥,可使 a-螺旋变得不稳定。 4 、组氨酸在生理 pH 条件下具有缓冲作用;在 pH6.0 时带净正电荷的氨基酸主要有赖氨酸、 精氨酸、组氨酸。 5、在 pH3 左右,氨基酸与阳离子交换树脂之间的静电吸引的大小次序是减刑氨基酸(A2+) A+ 0 中性氨基酸( )酸性氨基酸(A ) 。因此氨基酸的洗出顺序大体上是酸性氨基酸、中性氨 基酸,最后是碱性氨基酸,由于氨基酸和树脂之间还存在疏水相互作用,所以其洗脱顺 序为:Asp, Thr, Gly, Leu, Lys 。 6、茚三酮在弱酸性溶液中与α-氨基酸共热,引起氨基酸氧化脱氨脱羧反映,(其反应化学 式见 P139 ),其中,定量释放的 CO2 可用测压法测量,从而计算出参加反应的氨基酸量。 7、pI=(2.09+3.86)/2=2.98 8、具有紫外吸收能力的氨基酸有 Trp、 Tyr 、Phe ;其中以Trp 的吸收最强。 9、天然蛋白质在受到物理或化学因素(如热、酸、碱、紫外线、脲、表面张力等)影响时, 生物活性丧失、不对称性增加及其它理化性质发性改变的现象,称为蛋白质变性。其实 质是蛋白质分子中次级键被破坏,一级结构完好。 10、由(1)知:A 肽的 N 末端为 Asp 或 Asn ; 由(2 )知:A 肽的 C 天端为 Val ; 1 由(3 )知,其中第一个小肽因pH6.4 时净电荷为 0,故 Glu 和 Asp 中有且仅有一个是 酰胺形式,同时由(1)及胰蛋白酶的专一性知该小肽为Asp/n-(Glu/n, Ala, Tyr)-Lys ;第二小 肽因生成 DNP-His ,故 N 末端为 His ,又在 pH6.4 净电荷为正及(2 )中结果知该小肽为 His-Gln-Val ; 由(4 )知,第一小肽在pH6.4 净电荷为 0,故Asp 为酰胺形式,即 Asn ;因此第(3 ) 中第一小肽中 Glu 为酸性形式。此三个氨基酸序列为 Asn-Ala-Tyr 。第二个小肽在pH6.4 净 电荷为正,进一步验证了二个Glu 中有一个是酰胺形式即Gln 。 联合(3 )中第一小肽和(4 )中第一小肽的结构知(3 )中第一小肽序列为 Asn-Ala-Tyr-Glu-Lys ,再将此与(

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