罗丹明B类铜离子荧光探针地合成.doc

罗丹明B类铜离子荧光探针的合成 1、相关定义 1.1、荧光的基本概念与理论 1.2.1 荧光的产生1.2.1 荧光的产生 荧光是自然界中一种常见的光致发光现象。早在 1575 年,西班牙的一名植 物学家 N. Monardes 发现并记录了荧光的现象。直到 1852 年,Stokes 对荧光的 产生进行了解释,并提出了”荧光”这一术语[3],人们对于荧光现象与应用的研 究并开始不断地深入。如今,人们对于荧光已经有了非常明确的定义,当用某一 能量的光照射物质时,物质会发出各种不同颜色和不同强度的光,当光照停止时, 物质的发射光线也随之消失,这种发射光线就是我们所说的荧光[4]。更确切的来 说,荧光的产生其实就是电子跃迁与能量传递的过程,我们可以用 Jablonski 光 物理过程来形象地描述这个过程[5]。如图 1.1,当物质吸收一定频率的光子后, 处于基态分子内的的电子受激发跃迁到不同的能级,处于高能量的激发态能级的 电子很不稳定,会很快的通过内转化(IC)的方式回到较低能量的单重态激发态 的最低能级(S1),最终以辐射跃迁的方式发射光子,回到基态,此时发射的光 被称为荧光。当然,处于激发态的电子也会通过系间窜越(ISC)的方式回到三 1 硕士学位论文 重态激发态(T1),再以辐射跃迁的方式发射光子,回到基态(S0),这种发射 光称为磷光。激发态的分子还可以通过分子碰撞,键的振动与旋转,光诱导电子 转移(PET)、质子转移(ESIPT)、形成激基复合物与激基缔合物、共振能量转 移(EET)以及发生化学反应等多种非辐射跃迁方式释放能量,但这些非辐射过 程都会使荧光发生淬灭[5]。 Single excited statesTriple excited state VT S2ICT2 S1ISC VT T1 AbsorptionNRFluorescence (hv or 2hv)NRPhosphrescence Vibrational S0relaxation 图 1.1 Jablonski 光物理过程图 1.2、自由基定义及分类 自由基是指外层电子轨道含有不成对电子的分子或离子[2],由于其具有成单电子, 因此一般情况下不稳定、具有较活泼的化学活性。生物体内的自由基分为活性氧 (Reactive Oxygen Species, ROS)、活性氮(Reactive Nitrogen Species, RNS),主要包括 O2 ˉ、HO2 、 OH、LO 、LOO 氧自由基,以及NO、 NO2两种氮中心自由基,氧自由基 和氮自由基能够转化成其它非自由基的活性物质,例如H2O2、HOCl、HOBr以及ONOOˉ。 其中氧自由基约占机体总自由基的95 %以上[3]。 1.3、荧光传感器的概念 目前有许多检测金属离子的技术,例如:分光光度法、冷原子荧光光谱法、电化 学方法、高效液相色谱法、气相色谱法和电感耦合等离子体质谱法等。这些方法一般 都需要用到复杂且价格昂贵的仪器,存在分析步骤复杂、测试周期长等缺点。相反, 基于荧光传感器的检测技术在可实时性检测、灵敏性、选择性、响应时间等方面有显 著的优势。因此,研究人员投入了大量的精力来开发具有高选择性的离子荧光传感 器。 荧光传感器,又称荧光探针,是利用被检测物与某种荧光分子之间的相互作用引 发荧光强度或者发射峰的位置发生变化,从而达到被检测物的检测与信号传递。一般 情况下,由三部分构成荧光传感器,如图 1.2 所示,即:识别基团、信号基团和连接 体。识别基团部分,这部分的主要功能是特异性捕获被检测物(常以络合物的形式捕 获),并将结合后的信号通过连接体传送给信号基团,从而使得传感器产生荧光信号。 信号基团的主要作用是吸收特定波长的光以及产生荧光发射,并将被检测物与识别基 团结合所引起的化学环境变化转换成易于观测到的荧光信号。连接体的作用则是连接 识别基团与信号基团,并将识别信息有效转变成荧光强度或发射峰位置变化,达到对 被检测物的定量定性分析。 图 1.2 荧光传感器结构示意图 Fig.1.2 Schematic diagram of the fluorescence sensor 优良的荧光传感器一般需要具备以下几个条件:(1)用作传感器的荧光材料的荧光 发射强度应该比较高,以方便准确的检测到荧光信号;(2)发射峰的最大半峰宽应尽量 小,这样可以提高检测灵敏度;(3)由于许多有机荧光化合物在强光(如紫外光)照射 下,大部分荧光基团会发生解离而失去发射荧光的能力;紫外光照射生物样品会对其 生物活性产生一定程度的损害,所以荧光基团的激发波长应尽量处于长波长。 1.4、PSM定义 PSM这个术语来源于蛋白质的后合成修饰,通过一个完整多肤的化学修饰 引入了化学功能化[2’]。就像Na