螺旋藻大分子物质的分离提取和活性探究_0.doc

螺旋藻大分子物质的分离提取和活性研究 1、相关定义 1.1、微波的概念和性质 物质吸收微波能而发热的现象,称为微波热效应。微波最早应用于通讯和军 事,是频率在 300MHZ~300GHZ,位于电磁波谱的红外辐射(光波)和无线电 波之间,即波长在 1mm~1m之间的特殊电磁波。因其比无线电波更为微小,故称 之为”微波”。最常用的频率为 2450 MHz[6]。 1.2、糖类物质的定义、分类 中,并占药材干重 80-90%,是自然界存在的一大 类具有广谱化学结构的有机化合物,它不仅是动植物的燃料和能源(贮能材料如糖 元),也是代谢过程的中间产物,在生物过程中起着非常重要的作用,它是四大类生 物大分子,是除蛋白和核酸之外的又一类重要的生物大分子。 多糖是由不同的糖基通过糖苷键以不同方式的连接而成的,同时多糖分子还存 在不同糖环构型、连接位置、异头碳构型(α 或 β)、及支链数量及支链的位置等,所 以多糖结构的复杂性超过蛋白质和核酸,并增加了测定的难度,这也是糖生物学之 所以落后于基因和蛋白质研究的原因。在植物中,糖类物质的存在形式主要有三 种:单糖、寡糖和多糖,迄今为止,植物中发现了超过200种天然单糖,但多数单糖 是以结合的形式存在,只有少数糖如葡萄糖、果糖是以解离形式存在[1]。寡糖通常由 2-9 种单糖通过直链或者支链糖苷键连接,多糖则由超过 10 个甚至几千个以上单糖组 成,并有着非常不同的物理和化学性质,是近年来研究最为活跃的高分子化合物。 多糖的种类繁多,其来源大致可分为植物、动物、海藻和微生物(细菌和真菌) 多糖。植物多糖包括有淀粉、纤维素、果聚糖、半纤维素、树胶和粘液质等,如人 参、黄芪、枸杞、当归等中含有的多糖有抗肿瘤、抗衰老、抗肝炎、降血脂等广泛 的生物活性。动物多糖则包括在糖原、甲壳素、肝素、硫酸软骨素、透明质酸等。 海藻多糖多含有硫酸基,具高黏度或凝固能力,品种多、资源丰富,具有多种生物 活性,诸如抗病毒、抗肿瘤、抗辐射、抗突变、抗氧化和增强免疫力等。真菌多糖 主要存在于真菌的子实体、菌丝体及发酵液中[2-3]。在不同的部位含量有所不同,在 菌丝体的细胞壁和细胞质中含量较多,故真菌多糖主要是从菌丝体的细胞壁和细胞 质中提取。真菌多糖主要是通过真菌发酵培养实现,现已研究适于深层发酵培养的 大型食药用真菌有五十多种。 1.3、自由基的概念及其形成过程 氧是生物体中生命活动的基础物质之一。氧气一方面参与生物体的生命活动,在很 多有氧代谢过程中起着重要的作用,为生物体提供能量:另一方面在氧的代谢过程中, 电子的转移会导致形成活性氧,产生氧自由基。 自由基是人体组织中许多生化反应的中间代谢产物。它在体内可以通过多种途径产 生。如辐射、光、金属离子、化学毒物以及受刺激巨噬细胞的释放与呼吸过程等。 在化学结构上,自由基是指外层轨道上含有一个或一个以上未配对的电子的集团、 分子或原子,以小圆点( )来表示未配对的电子。氧分子轨道上有两个未成对电子,很 容易转变为自由基和活性氧[2]。活性氧包括超氧负离子自由基(O2- ),过氧化氢(H2O2), 羟基自由基( OH),一氧化氮(NO),三线态氧(3O2)和单线态氧(1O2)等。其中羟基 自由基( OH)与超氧阴离子自由基(O2- )是体内主要的活性氧自由基,占体内自由基 的 90%以上[3,4]。 羟自由基( OH)是一种氧化能力很强的自由基,人体在正常生命活动中通过新陈代 谢即可产生。羟基可以发生电子转移,夺取氢元子和羟基化等反应,可以使糖类,氨基 酸,蛋白质,核酸和脂类发生氧化遭受损伤和破坏,羟基与衰老,肿瘤,辐射损伤和细 胞吞噬有关。羟自由基为高反应性自由基,反应距离短,速度快,攻击力强,对细胞等 组织的毒性强,毒害大。可以使非自由基反应物变成自由基。因此羟基的检测在自由基 损伤研究中有中要的意义[5]。目前,离子检测羟自由基的方法有电子自旋共振法[6],化 学发光法[7],细胞色素 C 氧化法[8],光度法[9],荧光法[10]等。 超氧阴离子自由基是一种体内很易产生的自由基,它是由氧分子的一个电子还原而 2 成: +e- O2 O2- 超氧阴离子自由基是一类具有高度活性的物质,但在生物体内存在的时间很短,是氧的 源头,可衍生为其它的自由基,从而启动自由基连锁反应,使生物膜、激素和脂肪酸过 氧化。人体内存在着一系列酶和非酶系统可清除这些自由基[11],但在某些疾病或其他条 件下,如衰老,过度疲劳会加速自由基的产生从而影响人体正常的代谢,最终导致疾病 的产生。 1,1-二苯基苦基苯肼(1,1—diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH )是一种稳定的自由 基,它的化学性质十分稳定,即便是在室温溶液中也很稳定。它的稳定性主要来自共振 稳定作用及三