黑曲霉产生的酶类和其应用.pdf

维普资讯 7-q3 VoI lO No．4 淼 黧 黑 曲霉产生的酶类及其应用 T (中国科学院成都生物研究所天然药物开放实验室 成都 610041) 摘 要 黑曲霉是应用和工业酶学领域使用最广琵 的菌种之一 ，它 能产生丰富的酶类。 本文主要对黑 曲霉所产的一部分酶及应用情况进行了综述。 关键词 黑 曲霉 ，酶类 ，应用 0 _ _ ·__ ～ 黑曲霉 (As~vrgitlus,iger)是一种常见的真菌，属于半知菌类曲霉属 ]黑曲霉对营养要求较 低 ，只要培养基中含有碳源 、氮源及磷 、钾、镁、硫等元素即能生长 良好 。黑曲霉可以产生许多 种酶，现 已成为工业应用常见的菌种之一。根据Bigelis1989年的统计 ，25种主要商品酶制剂中 就有 15种来源于黑曲霉 。它们分别是 a一淀粉酶、过氧化氢酶、纤维素酶 、n一半乳糖苷糖 、 葡 萄糖酶、糖化酶、葡萄糖氧化酶、 葡萄糖苷酶 、半纤维索酶、橙皮苷酶 、脂肪酶 、柚苷酶 、果胶 酶 、蛋 白酶、单宁酶。美国FDA准许使用的食品工业用酶生产菌种只有黑曲霉、酵母、枯草杆菌 等约 20种，其中以黑曲霉所产酶类最多。我国酶制剂工业生产用菌种中，黑曲霉占了 l7种中 的 3种 ，即黑曲霉UVI1变异株、CP85211和 3350，它们分别用于糖化酶、果胶酶和酸性蛋 白酶 的生产 。黑曲霉酶类在工业上具有重要的作用 ，例如，柠檬酸等有机酸的发酵生产、食品及饮 料加工以及用于轻化工业、纺织工业、饲料加工和废物的处理等等 。总之，黑曲霉生产的酶制剂 具有用量大、应用范围广、安全性好的特点，已愈来愈受到人们的重视 为此 ，有必要对这些酶 及其应用作一综述 。 1 黑曲霉所产酶类及应用 1_1 黑曲霉所产酶类举例 1．1．1 葡萄糖氧化酶 (GlucoseoxidaseEC1．1．3、4)：来 自于黑曲霉的葡萄糖氧化酶能催化葡 萄糖生成葡萄糖酸 内酯的反应 ]。80年代，有人发现这种酶可被高浓度的葡萄糖诱导 ，但 同时 必须使氨和磷酸盐类营养物质保持低浓度 ，葡萄糖氧化酶的生成是黑曲霉对增加碳源供应 所作出的一种反应，并因此导致 DH值的下降和 H：Oz的产生 pH值和氧是影响葡萄糖被氧化 生成葡萄糖酸 内酯的两个关键因素 ]。黑曲霉中编码葡萄糖氧化酶的基因最近 已经被克隆并 被测序 。此酶的前体物含有 583个氨基酸 ．分子量为 75kD。N一末端 22个氨基酸的信号肽表 明，该酶易受分泌途径的加工处理 ，人们还检测到它的几个 N一糖基化位点 总的说来 ，对这种 酶的研究 已经 比较深入 。 收稿 日期 ；1997年 12月 9 日 *国家 自然科学基金 资助项 目 **通讯联 系凡 维普资讯 天然产物研究与开发 1．1．2 用于淀粉加I的酶：淀粉是食品工业用量最大的碳水化合物原料 。在许多食品的加 工过程 中，淀粉首先被水解成含有葡萄糖、麦芽糖和其它低分子量糊精的糖浆，这些糖再进一 步 由异构酶转化成一种更有效的甜味剂——高果糖糖浆 。酶法水解淀粉 比酸水解要好 ，这是因 为酶法可 以很容易地控制水解 的程度和最终产物 的组成 。1988年 ，WestlI估计用于把淀粉 转化成其他商品的这类酶市场价值达 1亿美元 ／年 。这其中有相当一部分份额 由黑曲霉酶类所 占有 。 1)q一淀粉酶 (q—arftylaseEC3．2．1．1．) q一淀粉酶能水解 1，4糖苷键 ，它是产量丰富的胞 外酶，产生于以淀粉为唯一碳源的培养基中。黑曲霉能产生两种主要的 一淀粉酶，即中性 一淀 粉酶和酸稳定性 淀粉酶 。这两种酶的大多数物化性质十分相似 ，但它们也有不同 ：酸稳定 性 淀粉酶用酸处理仍然保持有酶活性 ，中性 淀粉酶则很快失活 。另外 ，酸稳定性n一淀粉酶 的报道仅见来源于黑 曲霉 ，而多种 曲霉都能产生 中性 淀粉酶 ，中性 一淀粉酶于 1976年在黑 曲霉的发酵液中被发现 黑 曲霉的中性 淀粉酶与主要的中性 *淀粉酶 (来源是米 曲霉)的 物化性质非