现代仪器分析（徐鹏）实验五 高吸光度示差分析法.docVIP

实验二 高吸光度示差分析法 一、目的： 通过标准曲线的绘制及试样溶液的测定，了解高吸光度示差分析法的基本原理，方法优点。掌握721型分光光度计的使用方法。 二、原理： 普通吸光光度法是基于测量试样溶液与试剂空白溶液（或溶剂）相比较的吸光度，从相同条件下所作的标准曲线来计算被测组份的含量，这种方法的准确度一般不会优于1～2%，因此，它不适合于高含量组份的测定。 为了提高吸光光度法测定的准确度，使其适合于高含量组分的测定，可采用高吸光度示差分析法。示差法与普通吸光光度法的不同之处，在于用一个待测组份的标准溶液代替试剂空白溶液作为参比溶液，测量待测量溶液的吸光度。它的测定步骤如下： (1)在仪器没有光线通过时（接受器上无光照射时）调节透光率为0，这与比色法或普通分光光度法相同。 (2)将一个比待测溶液（浓度为C＋△C）稍稀的参比溶液（浓度为C）放在仪器光路中，调节透光率为100%。 (3)将待测量溶液（或标准溶液）推入光路中，读取表现吸光度Af。 表观吸光度Af实际上是由△C引起的吸收大小，可表达为： Af=ab△c 上式说明，待测溶液（或标准溶液）与参比溶液的吸光度之差与这两次溶液的浓度差成正比。 无论普通吸光度或高吸光度示差法，只要符合比尔定律，而且测量误差仅仅是由于透光率（或吸光度）读数的不确定所引起的，则可以方便地计算出分析的误差。 仪器刻度上透光率读数改变数（dT）所引起的浓度误差dc为绝对误差，它与透光率有关，其关系式容易由比耳定律推得： Af=ab△c=k△c lgT=-Af=-k△c 0.43lnT=-k△c ·dT 式中k为标准曲线（A～C）的斜率。实验中三条曲线的三个k很接近。根据k值及上述关系可以计算出实验中各点的绝对误差（假设透光率读数误差为l%，即dT=0.01）。 对于化学工作者来说，更有意义的是浓度的相对误差()，或者相对百分误差(×100)。浓度相对百分误差与参比溶液的浓度关系密切。随着有色参比溶液浓度的增加（或A的增加），相对百分误差也随之减小。当所用参比溶液的A=1.736时，最低的相对百分误差也可减小至0.25%。由此可见了，差示法中高吸光度法可达到容量分析和重量分析的准确度。 三、仪器与试剂 721型分光光度计（附2只1厘米比色皿） 0～10ml微量滴定管1支（刻度准确至0.005ml） ml容量瓶× 0.5000M Cr（NO3）3 四、实验步骤 l、标准溶液的配制 在16支25ml容量瓶中，用微量滴定管分别放入1.0,2.0,3.0，4.0，5.0，6.0，7.0，8.0，9.0，10.0，11.0，12.0，13.0，14.0，15.0，16.0ml，0.00 M Cr（NO3）3溶液（也可放置相接近的毫升数，但须正确读到0.005ml），再用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。 2、标准曲线的绘制及待测溶液的测定 选择一对合适的厚度为lcm比色皿，在550nm波长下分别测量下列三组溶液的吸光光度。(1)以蒸馏水为参比溶液，测量1.0～5.0m1 0.00M Cr（No3）3/ml溶液的吸光度。 (2)以5.0m1 0.2500M Cr（NO3）3/m1溶液为参比溶液，测量6.0～11.0ml0.00M Cr（NO3）3/ml溶液的吸光度。 (3)以10.0ml 0.00M Cr（NO3）3/ml溶液为参比溶液，测量11.0～16.0ml 0.00M Cr（NO3）3/ml溶液及待测溶液的吸光度。 (4)为了消除由于标准溶液浓度、液槽厚度与光学性能不一致所带来的误差，常采用中性滤光片代替参比溶液，以获得良好的结果。 以中性滤光片（相对空气其A约为1.0）代替参比溶液，测量11-16毫升0.00 M Cr（NO3）3/ml溶液及试样溶液的吸光度。（注意：应固定中性滤光片的位置） 五、结果与处理 1、在同一坐标纸上绘制（l）-（3）组的A-C标准曲线。 2、从（3）组标准曲线上求算待测溶液的溶度。 3、根据（1）-（3）组标准曲线，分别求其K值，然后计算出每个实验点的×100，绘制（1）-（3）组×100～T图，从图可以引出什么结论。 六、思考题． 1、在普通分光光度法中，若透光率读数改变0.01，最小误差点（即T=36.8%）的相对百分误差是多少？ 2、根据实验数据，指出哪一个实验点的相对百分误差最低？比普通分光光度法中T为36.8%处精确多少倍？ 七、参考资料 1、朱世盛，《仪器分析》，第37页，复旦大学出版社，1983。 2、田笠卿，化学通报，第5期，301页，1963年。