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第十三章 DNA的生物合成 第一节 半保留复制 ★ 第二节 DNA的生物合成★ 第三节 DNA的损伤与修复★ 第四节 DNA重组 第一节 半保留复制 定义: 半保留复制 ◆实验证据: 1958 Meselson and Stahl 半保留复制的 生物学意义？ 第二节 DNA的生物合成 一、DNA合成的通式和方向 ★ 二、DNA复制所需的酶类及蛋白因子 三、DNA的复制过程(大肠杆菌) ★ 四、真核细胞的DNA复制 五、逆转录（RNA→DNA） 二. 与复制有关的酶和蛋白因子 原核生物中： • DNA聚合酶 • DNA单链结合蛋白 • 引物酶 • 拓扑异构酶 DNA聚合酶 DNA复制的关键酶 底物:dATP,dGTP,dCTP,dTTP 镁离子参与 引物3 ′-OH 模板DNA 5 ′→3 ′方向聚合合成DNA 具有5 ′→3 ′3 ′→5 ′方向的外切酶活 力 （一）DNA聚合酶(DNA polymerase) 1. DNA聚合酶I (DNA pol Ⅰ) 单链；109kD；含1个Zn ； 特异的蛋白酶可将其降解为一大和一小两部分 较大的部分叫Klenow片段， 具5’→3’聚合酶活性； 具3’ →5’外切酶活性；能纠正错误 小片段：具5’ →3’外切酶活性; 切除受损伤的DNA小片段和RNA引物. Structure of the Klenow fragment with a bound DNA fragment 功能: DNA聚合酶I用于修复DNA双螺 旋区中的单链区和RNA引物的切除。 2，DNA聚合酶Ⅱ • 具有5’→3’聚合作用和3’→5’外切酶活性； 可能在DNA的损伤修复中起到一定作用。 3. DNA聚合酶III : 是由10种亚基组成的异二聚体 核心酶 核心酶组装 滑动钳装 载复合物 组成滑动钳蛋白 核心酶 滑动钳装载复合物 滑动钳蛋白 Diagram of the subunit composition of E. coli DNA polymerase III DNA聚合酶III ：主要的复制酶 功能: DNA链延伸的主要DNA聚合酶. α亚基具5’→3’聚合酶活性 ε亚基具3’ →5’外切酶活性 θ亚基可能在核心酶组装中起作用 γ亚基：依赖于DNA 的ATP酶活性 DNA聚合酶III 的复杂结构使其具有更高 的忠实性，协同性和持续性。 4 ，DNA聚合酶IV和V • DNA聚合酶IV和V,1999年发现 • DNA聚合