SOP-SC-009-01血浆样本分离操作规程.PDFVIP

最佳实践规范及标准操作流程文件汇编 V2.01 上海生物样本库 最佳实践规范及标准操作流程 文件汇编 （第二版） 2010年5月 最佳实践规范及标准操作流程文件汇编 V2.01 上海生物样本库 质量管理体系文件 文件名称 血浆样本分离操作规程 编号 SOP-SC-009-01 批 准 人 批准日期 实施日期 血浆样本分离操作规程 1.目的 规范组织样本库血液样本采集后血浆分离的标准操作规程。 2.适用范围 本规程适用于从使用抗凝剂的全血中分离血浆标本。 3.定义和术语 3.1 血浆 血浆是指离开血管的全血经抗凝处理后，通过离心沉淀，所获得的不含细胞 成分的液体，其中含有纤维蛋白原。 4.职责 4.1样本管理员 对抗凝血进行血浆的分离。 5.设备和器材 5.1 个人防护装备 手套、口罩、实验防护服、护目镜及其它相关防护装备。 含有漂白剂的废液缸。 5.2 容器 无菌可立冻存管和无菌消毒离心管。 5.3 仪器设备 与离心管配套的高速冷冻离心机（离心力可达2500g）。 移液器及无菌枪头。 5.4 试剂 1 最佳实践规范及标准操作流程文件汇编 V2.01 75%医用酒精。 6.主要流程 6.1 血浆分离 6.1.1血液样本采集的过程请参见 《血液样本采集操作规程》中的具体流程。 6.1.2 离心分离血浆：5ml 全血采集至抗凝管后需立即离心，离心条件为： 离心力815g,时间10分钟，温度为4℃。 6.1.3提取：离心后上部清液为血浆，用移液器取上部清液血浆至消毒离心 管中，剩余部分保留用作分离白细胞。白细胞分离参见《白细胞样本分离操作规 程》。 6.1.4二次离心：把装有血浆的消毒离心管进行二次离心，离心条件为：离 心力2500g,时间10分钟，温度为4℃。 血浆进行二次离心的目的是为了去除所有的细胞污染物，使得所得到的血浆 适合做DNA的分析。 6.1.5分装：把离心后的上清液分装至5支可立冻存管中，每支0.5ml。 6.1.6速冻：血浆分装至冻存管后应立即竖直置于液氮罐中速冻，速冻时间 约30秒。 6.1.7速冻后转运储存在液氮罐或-80℃冰箱中。储存的过程和要求参见 《样 本储存控制程序》和《血液样本储存操作规程》。 6.2 注意事项： 6.2.1全血采集到抗凝管后应尽快离心分离，若不能立即分离，从采集到分 离的时间不应超过1小时，应在低温条件下保存和转运，并做好时间和温度的记 录。 6.2.2离心机使用时应注意安全，保持离心机的平衡。 6.2.3为保证所分离的血浆中已经去所有的细胞污染物，对第一次和第二次 离心后的试管都要轻拿轻放，避免扰动。 6.2.4离心管、枪头和冻存管必须消毒并保持洁净，避免污染。 7.相关文件 《血液样本采集操作规程》 SOP-SC-008-01 《白细胞样本分离操作规程》 SOP-SC-011-01 2 最佳实践规范及标准操作流程文件汇编 V2.01 《样本储存控制程序》 S