遗传学实验 植物多倍体的诱发.pdfVIP

遗传学实验 1 一、实验目的 ①了解人工诱发多倍体植物的原理及其在 植物育种上的意义； ②掌握人工诱发多倍体植物的方法技术； ③观察多倍体植物的特征，鉴别植物多倍 体染色体数目的变化及引起植物其它器 官的变异。 遗传学实验 2 二、 实验原理 1、自然界各物种的染色体数目是相当恒定的，这是 物种的重要特征。绝大多数高等生物的每一体细胞 中含有两套同样的染色体—— 同源染色体，是二倍 体，用2n表示。它们的每一配子中只含有一套染色 体，称为单倍体，用n表示。遗传学上把一个配子的 染色体数称为染色体组（或称基因组），但有时一 个配子中含有几个染色体组。一个染色体组内含有 的染色体数又称为基数，通常用x表示。 遗传学实验 3 二、实验原理 2、细胞内多于两套染色体组的生物体称为多倍体。 例如三倍体(3x)、四倍体(4x)、六倍体(6x)。 多倍体普遍存在于植物界，目前已知道被子植物 中有1/3或更多的物种是多倍体。 除了自然界存在多倍体物种之外，又可以采用高 温、低温、X射线照射、嫁接和切断等物理方法人 工诱发多倍体植物。在诱发方法中，以应用化学药 剂更为有效。如秋水仙素、异生长素、富农民等， 都可以诱发多倍体，其中以秋水仙素效果最好，使 用最为广泛。 遗传学实验 4 二、实验原理 3、秋水仙素是由百合科植物秋种番红花——秋水仙 的种子及器官中提炼出来的一种生物碱。它具有麻醉 作用，对植物种子、幼芽、花蕾、花粉、嫩枝等可产 生诱变作用。 其主要作用是抑制细胞分裂时纺锤体的形成，使染 色体不走向两极而被阻止在分裂中期，且细胞不能继 续分裂，从而产生染色体数目加倍的核。若染色体加 倍的细胞继续分裂，就形成多倍性的组织，由多倍性 的组织分化产生的性细胞，所产生的配子是多倍的， 因而也可以通过有性繁殖方法把多倍体繁殖下去。 遗传学实验 5 三、试剂、材料 1、器皿及仪器：培养皿（Φ=9cm ）、 250mL烧杯（带纱网），50mL烧杯，水浴锅， 盖玻片、载玻片、解剖针、显微镜等。 2 、试剂：0.1%秋水仙素、0.025%秋水仙素 、卡诺氏固定液、70%乙醇、0.1M盐酸、改 良卡宝品红染色液。 3、材料：大蒜鳞基、小麦种子、玉米种子 遗传学实验 6 四、实验方法 （一）大蒜根尖多倍体细胞诱发 1、发根：在50mL烧杯中加适量自来水，将大蒜鳞 基置烧杯上，底部浸入水中。 2、秋水仙素处理：约3天后（根长1~1.5cm），将 根尖浸于0.1%秋水仙素溶液中48h 。由于培养时间 较长，需要添加秋水仙素溶液。以未处理作为对照。 3、复苏：自来水冲根尖4-5次充分除去秋水仙素， 再用自来水培养根尖至2.5cm 以上。 遗传学实验 7 四、实验方法 • 4 、观察记录：根尖膨大情况、生长速度、 染色体数目观察。 • 关于根尖染色体制片——上午10点左右、 下午4点左右取根尖，进行0.02-0.05%秋水 仙素溶液处理2-4h 。然后固定、解离、低渗 、染色、压片、镜检，观察染色体加倍情 况。