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默克密理博pET原核表达工具简介
16/05/2014
提高活性蛋白表达水平，事半功倍
——默克密理博Novagen重组表达平台介绍与经验分享
如果能大幅提高蛋白产量……
1
16/05/2014
重要原则：选择合适的表达平台（宿主）
Vector Host
表达载体 宿主细胞
Growth conditions
培养条件
重要原则：选择合适的载体
克隆载体和表
达载体共有
pET系列
复制子：
• 质粒产量-蛋白产量
• 多个质粒共表达
2
16/05/2014
重要原则：选择合适的载体
克隆载体和表
达载体共有
pET系列
筛选标记：
• 常用青霉素/卡那霉素
• 链霉素/ 四环素等
3
16/05/2014
重要原则：选择合适的载体
启动子：带有T7 Lac启动子的pET系列表达载体成为金标
强势而可控
pET系列
T7Lac启动子
加强严紧控制
以获得更稳定
的表达
4
16/05/2014
重要原则：选择合适的载体
pET系列
终止子：转录水平的
终止，也可考虑翻译
水平的终止
重要原则：选择合适的载体
pET系列
多克隆位点：
• pET系列共同的设计
便于亚克隆
• 决定了载体来源序列
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