动物实验基本技术操作060308.ppt

* * (2)急性失血法： 先使动物轻度麻醉，如犬可按每千克体重静脉注射硫喷妥钠20～30mg，动物即很快入睡。暴露股三角区，用锋利的杀犬刀在股三角区作一个约10cm的横切口，把股动、静脉全切断，立即喷出血液。用一块湿纱布不断擦去股动脉切口周围处的血液和血凝块，同时不断的用自来水冲洗流血，使股动脉切口处保持畅通，动物在3～5min内即可致死。采用此种方法，动物十分安静，对脏器无损伤，对活杀采集病理切片标本是一种较好的方法。 (3)破坏延髓法： 如果急性实验后，脑已暴露，可用器具将延髓破坏，导致动物死亡。对家兔也可用木锤用力锤击其后脑部，损坏延髓，造成死亡。 (4)开放性气胸法： 将动物开胸，造成开放性气胸。这时胸膜腔的压力与大气压相等，肺部因受大气压压缩发生肺萎陷纵隔摆动，动物窒息而死。 (5)化学药物致死法： 静脉内注入一定量的氯化钾溶液，使动物心肌失去收缩能力，心肌急性扩张，致使心脏缓慢停跳而死亡。每只成年兔由兔耳缘静脉注入10％氯化钾溶液5-10ml；每条成年犬由犬前肢或后肢下静脉注入20～30ml，即可致死。福尔马林士的年 DDT * * * * * * * * * * * * * 标记时，用标记笔蘸取上述溶液，在动物体表不同部位涂上斑点，以示不同号码。编号的原则是：先左后右，从前到后。一般把涂在左前肢上的记为1号，左侧腹部为2号，左后肢为3号，头顶部为4号，腰背部为5号，尾基部为6号，右前肢为7号，右侧腰部为8号，右后肢为9号。若动物编号超过10或更大数字时，可使用上述两种不同颜色的溶液，即把一种颜色作为个位数，另一种颜色作为十位数。这种交互使用可编到99号。例如把红色的记为十位数，黄色记为个位数，那么右后腿黄斑，头顶红斑，则表示是49号鼠，以此类推(图5-7)。 * * 一般习惯在耳缘内侧打小孔，按前、中、后分别表示为1、2、3号，在耳缘部打成一缺口，则分别表示4、5、6号，打成双缺口状则表示7、8、9号。右耳表示个位数，左耳表示十位数。再加上右耳中部打一孔表示100，左耳中部打一孔表示200，按此法可编至400号， * * 2）眼眶动脉和静脉采血法 用左手抓住鼠，拇指和食指将鼠头部皮肤捏紧，使鼠眼球突出。右手取一弯小镊子在鼠右侧眼球根部将眼球摘去，并立即将鼠倒置，头朝下，此时眼眶内动、静脉很快流血，将血滴入预先加有抗凝剂的玻璃器皿内，直至动、静脉不再流血为止。此种采血法在采血过程中动物没有死，心脏跳动在继续，因此采集到的血量比其他方法要多，若实验时需多量血液，此种方法最好。 3）后眼眶静脉丛采血法 取血时，徒手抓取动物，即左手从背部抓住动物，用左手的拇指和食指、中指握住动物颈部，利用对颈部所加的轻压力，使头部静脉淤血，在突出的眼球旁分辨出后眼眶静脉。 穿刺部位是在眼球和眼眶后界之间的后眼眶静脉丛。用10％可卡因局部麻醉，右手持消毒过的毛细吸管吸取抗凝剂湿润其内壁，从内侧眼角将吸管转向前，并轻压刺入Tenon筋膜，然后由鼻侧眼眶平行地对喉头方向推进，深约4-5mm，到达后眼眶静脉丛，血液自然进入吸管内。采集到所需要的血液量后，即除去加于颈部的压力，同时抽出毛细吸管。 此种采血方法可以采集较多量的血液，动物休息数分钟后，可继续在同一穿刺孔重复采集血液。 * * 图5-1 鼠尾静脉采血法 图5-2 大鼠后眼眶静脉丛采血法 * * 4）心脏采血法 固定板法：将鼠仰卧固定在固定板上，左侧心区部位剪毛，碘酒、酒精消毒。左手在鼠左侧3-4肋间摸到心搏，或手持装有小号针头的注射器，选择心搏最强处穿刺，当针头正确刺入心脏，血液依靠心搏的力量自然进入注射器，即可采集血液。 徒手法：在熟练情况下，一人徒手即可采血，即左手拇指和食指握住颈部，小拇指压住鼠尾使之仰卧在左手心内，右手持注射器在左心区经消毒处理的部位，心搏最强处刺入心脏，即可采集血液，此法最适合小白鼠的心脏采血。 * * 图5-3 小鼠心内取血方法 * * 5）断头采血法 操作者左手拇指和食指握住大、小白鼠颈部，头部朝下，用利剪在鼠颈头间1／2处剪断，提起动物，将血液滴入放有抗凝剂的容器内。小鼠可采血1ml左右，大鼠可采血10ml左右。 * * 2. 豚鼠的采血方法 1）心腔穿刺采血法 将豚鼠仰卧固定于小手术台上，左侧心区部的剪毛、消毒。触摸心跳最明显处进针穿刺。进针角度与胸部垂直，当针头接近心脏时，就会感到心脏的跳动，再向里穿刺就可进人心室。将注射器抽成负压，血不断地自动流入注射器内。采血时动作要迅速，缩短留针