PCR技术的微型化.pdf

Seminar Ⅱ PCR技术的微型化 PCR技术的微型化 ◆ PCR技术及其微型化 ——芯片PCR技术 ◆ PCR芯片的制作 ◆ 芯片PCR技术的分类 ◆ 芯片PCR技术的集成 PCR基本原理示意图 n cycles N =N (1+E)n t 0 常规PCR方法存在如下缺点： (1) 热容大，升/降温速率慢,反应时间长： (2) 反应溶液温度不均匀,影响特异性： (3) 试剂/能量消耗大。 化 型 微 芯片PCR方法:微型化﹑集成化﹑自动化﹑便携式 (1) 升/降温速率大幅提高,反应时间成倍缩短； (2) 微反应室比表面积大, 扩增效率提高; (3) 试剂/能量消耗降低; (4) 易于集成化和功能化。 比 较 项 目 常规 PCR 芯片 PCR 反应体系热容 较大 较小 0.2(聚丙烯管) 157(硅) 材料热导率/(W/m•K) 0.7～1.1(玻璃) 反应器比表面积 较小 增大10～1000倍 反应液体积/μl 20～100 0.01～10 反应液温差/(±℃) 可高达10℃ 1℃ 升/降温速率/(℃/s) 2～3 5～90 平均循环时间/min ～5 0.2～1 PCR扩增时间/min 90～180 4～30 反应过程集成化程度 难以集成化 易集成其它功能单元 常规PCR方法与芯片PCR方法的比较 材料 制作方法 封接方式 反应器构型 反应室体积 表面处理 硅 光刻/蚀刻 油封等 微室 1～2μL或25μL SiO /BSA 2 或阵列 或加塑料管 硅/ 光刻/蚀刻 阳极键合 微室 1.3pL～32μL SiO /BSA 2 玻璃 或粘接 或阵列 或2～10μL 或硅烷化 玻璃 光刻/蚀刻 高温或 微室或 0.2～0.28μL 静态、动态 低温封接 储液池 或6～12μL 涂层/BSA SU-8/ MEMS技术