提取液及固－液分离方法对固态非淀粉多糖酶类活性的-动物营养学报.PDF

动物营养学报２０１６，２８（１０）：３３５２⁃３３５８ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ 　 ｄｏｉ：１０．３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１００６⁃２６７ｘ．２０１６．１０．０４０ － 提取液及固 液分离方法对固态非淀粉 多糖酶类活性的影响 １，２ １∗ ２ ∗ １ 廖　 睿 　 赵　 峰 　 齐智利 　 张宏福 （１．中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，动物营养学国家重点实验室，北京 １００１９３； ２．华中农业大学动物科技学院，武汉 ４３００７０） － × 摘　 要： 本试验旨在探讨固态酶制剂评估中酶的适宜提取液及固 液分离方法。 采用４ ３ 双因 － 素完全随机设计，其中提取液分别为去离子水、乙酸 乙酸钠缓冲液（０．１ ｍｏｌ／ Ｌ，ｐＨ ５．５０）、磷酸 － 盐缓冲液（０．０５ ｍｏｌ／ Ｌ，ｐＨ ６．００）和０．９％ＮａＣｌ 溶液；溶液提取后的固 液分离方法分别为不分 离、３ ０００ ｒ／ ｍｉｎ 离心３ ｍｉｎ和中速滤纸过滤。 每个处理５ 个重复，每个重复设２ 个平行，测定各 － 个处理下酶的活性，并考察提取液的类型对酶制剂产品（α 半乳糖苷酶除外）溶解离心后溶液 中溶质及蛋白质含量的影响。 结果表明，磷酸盐缓冲液溶解木聚糖酶后活性最高（Ｐ＜０．０５）；乙 － － 酸 乙酸钠缓冲液、磷酸盐缓冲液及０．９％ＮａＣｌ 溶液溶解 β 葡聚糖酶后活性相当（Ｐ＞０．０５），且 － － 均显著地高于去离子水（Ｐ＜０．０５）；去离子水溶解β 甘露聚糖酶后活性最高，其次为乙酸 乙酸 － 钠缓冲液，两者都显著地高于磷酸盐缓冲液和０．９％ＮａＣｌ 溶液（Ｐ＜０．０５）。 提取液类型对α 半 － 乳糖苷酶活性无显著影响（Ｐ＞０．０５）。 酶制剂溶解后的固 液分离方法对木聚糖酶的测定活性 － 无显著性影响（Ｐ＞０．０５）；提取液离心或过滤后 β 葡聚糖酶活性最高（Ｐ＜０．０５）；提取液离心后 － － β 甘露聚糖酶活性最高（Ｐ＜０．０５）；而提取液不分离时α 半乳糖苷酶的活性最高（Ｐ＜０．０５）。 提 － 取液的种类和酶制剂溶解后的固 液分离方法对４种非淀粉多糖酶的测定活性有极显著的交互 － 作用（Ｐ＜０．０１）。 乙酸 乙酸钠缓冲液对木聚糖酶制剂的溶解度最大（Ｐ＜０．０５），去离子水和 － － － ０．９％ＮａＣｌ溶液均对