第六章 细胞及冻复苏与运输.pptVIP

 第六章  细胞的冻存、复苏与运输 细胞冷冻、复苏的发展历史简介 　 1776年，Spallanzani最早发表了“冷”处理对“细胞”生命活动影响的报道。 　 到了1900年前后，科学家基本上肯定了生物成分(如精子)能够在零下温度贮存的事实。 　 1949年，Polge等人发现了甘油对低温下贮存细胞的保护作用。 Luyet(1951)与Lovelock(1953)等多位学者发现电解质浓度增大是造成冷冻贮存细胞损伤的主要原因。 　 1959年，Lovelock等人发现了一种新的化学保护剂，这就是现在人们熟知的二甲基亚砜(DMSO)。 　 当前低温液氮冻存贮存细胞已是细胞培养室常规性通用技术 ，贮存时间几乎是无限的。 　 一、培养物的冷冻保存与复苏原理 冷冻保存(cryopreservation)：将体外培养物悬浮在加有冷冻保护剂的溶液中，以一定的冷冻速率降至零下某一温度(一般是低于-70℃的超低温条件)，并在此温度下对其长期保存的过程。 复苏(thawing)：是以一定的复温速率将冻存的培养物恢复到常温的过程。 无论是微生物、动物细胞、植物细胞还是