第四章 动物细胞及微囊化培养.pptVIP

动物细胞大规模培养存在的困难 1、动物细胞生长速率慢，产物的生产率也低，从而造成产物浓度也低。 2、动物细胞培养基成分复杂，价格昂贵。 3、动物细胞没有细胞壁，易受机械搅拌所引起的剪切力的影响。 4、常规的细胞培养方法也不太适用于大规模培养。 上述这些限制造成了大规模动物细胞培养所需费用高，技术难度大（规模越大、影响也越大）。 随着生物工程的发展，使得很多原先只有动物体产生的蛋白质可由重组微生物生产，如重组大肠杆菌表达和生产人胰岛素和人生长激素。然而，由于微生物细胞缺乏蛋白质的转录后修饰机制，由重组微生物产生的不少蛋白质分子不具有所期待的生物学功能和活力。 动物细胞的大规模的培养确有不小的困难，但它的优点也是很明显的、诱人的，关键是如何提高细胞在反应器内的密度，提高细胞的稳定性以及生产率。动物细胞的固定化以及培养是解决问题的有效途径。 微囊半透膜的孔径 是培养基营养成分、代谢物进行膜内外交换、截留一定分子量蛋白在囊内的关键，如何选择是一重要问题。 微囊的膜是多阴离子的海藻酸与多阳离子的聚赖氨酸相互作用而形成的。研究表明，此半透膜的孔径主要由聚赖氨酸的分子量决定，一般来说用高分子量的聚赖氨酸(PLL)覆膜孔径大，PLL分子量低、孔径小，通常使用相对分子量为40000-80000的PLL。研究还表明，PLL溶液的浓度及处理时间、溶液的PH及使用温度也都会影响膜的孔径。 微囊的质量 海藻